羅格列酮對大鼠急性心肌梗死再灌注后無再流的影響及機制.pdf

1、目的：急性心肌梗死再灌注后心肌微循環(huán)無再流現(xiàn)象的發(fā)生與缺血／再灌注損傷引起的微血管痙攣和阻塞等多種因素有關。其中，炎癥的顯著激活是缺血再灌注的重要特征。本課題以大鼠急性心肌梗死再灌注動物模型為基礎，擬解決以下問題：急性心肌梗死再灌注后不同時相無再流范圍的變化及炎癥信號通路 NF-кB和炎癥基因ICAM-1、P-選擇素的表達變化；羅格列酮對再灌注后無再流范圍的影響；羅格列酮對無再流范圍的影響與NF-кB調(diào)控的關系；羅格列酮對無再流范圍的影

2、響與 NO生成通路調(diào)控的關系；羅格列酮對NO生成通路和NF-кB通路調(diào)控的內(nèi)在聯(lián)系。
　　方法：結扎大鼠冠脈左前降支3小時后再通，建立急性心肌梗死再灌注模型，于再灌注后0、2、8、24、72h五個時間點染色或取材，病理染色法檢測無再流范圍（ANR％），化學比色法檢測缺血區(qū)MPO活性，免疫組化、Western blotting及 RT-PCR等方法檢測缺血區(qū)ICAM-1、P-選擇素、NF-кBp65、p-IкBα等蛋白或mRNA表達

3、的變化；隨后，給予羅格列酮藥物預處理后，檢測再灌注后2小時上述指標的變化；最后，于羅格列酮預處理的同時給予 NOS抑制劑 L-NNA，并檢測再灌注后2小時上述指標的變化。
　　結果：①再灌注后72 h內(nèi)ANR%從再灌注即刻的22.5±4.6%發(fā)展到72 h的79.7±7.3%，再灌注后2 h內(nèi)ANR%擴展最快；在此過程中缺血區(qū)心肌 NF-кB p65、細胞質 p-IκBα蛋白含量、ICAM-1、P-選擇素蛋白及mRNA表達、MPO

4、活性等指標均顯著上調(diào)，之后逐漸減低；②中劑量及大劑量羅格列酮使AMI再灌注后2小時心肌無再流范圍顯著減??；③中劑量及大劑量羅格列酮使AMI再灌注后2小時缺血區(qū)心肌組織 NF-кB p65、細胞質 p-IκBα蛋白含量、ICAM-1、P-選擇素蛋白及mRNA表達、MPO活性等指標較安慰劑組均顯著減低；④羅格列酮預處理顯著升高缺血區(qū)心肌p-eNOSS1177蛋白含量，但對心肌組織eNOSmRNA表達無明顯作用；⑤合用L-NNA后，羅格列酮減

5、小無再流范圍的作用被顯著抑制；⑥合用L-NNA后，羅格列酮對缺血區(qū)NF-кB p65蛋白表達、細胞質p-IκBα蛋白含量、MPO酶活性等指標的影響被抑制。
　　結論：⑴大鼠AMI再灌注后72小時內(nèi)無再流進行性擴展，而再灌注后無再流范圍擴展高峰在2小時內(nèi)；再灌注后缺血區(qū) NF-кB、P-選擇素及 ICAM-1表達增強及缺血區(qū)中性粒細胞粘附、聚集與無再流范圍擴展有明確的關系，抑制NF-кB及粘附分子表達可能是潛在的預防無再流的策略。⑵