金釵石斛總堿對(duì)體外低氧低糖培養(yǎng)海馬神經(jīng)元BACE1和Aβ的影響.pdf

1、目的：1.觀察體外低氧低糖培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的活力、BACE1和Aβ的變化，探討血管性癡呆可能的發(fā)病機(jī)制。2.觀察金釵石斛生物總堿對(duì)體外低氧低糖培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的活力、BACE1和Aβ的影響，探討金釵石斛生物總堿治療血管性癡呆可能的機(jī)制。
　　 方法：取新生SD大鼠海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)，并行nissel染色和特異性免疫熒光染色鑒定；在培養(yǎng)至第八天時(shí)，將培養(yǎng)神經(jīng)元分為：正常對(duì)照組、溶媒對(duì)照組、DNLA對(duì)照組、低氧低糖組、DNLA干預(yù)組。正

2、常對(duì)照組進(jìn)行正常培養(yǎng)，溶媒對(duì)照組在正常對(duì)照組的基礎(chǔ)上加入溶媒培養(yǎng)，低氧低糖組在低氧低糖狀態(tài)下進(jìn)行培養(yǎng)，DNLA對(duì)照組加入高劑量DNLA進(jìn)行正常培養(yǎng)，DNLA干預(yù)組在低氧低糖組的基礎(chǔ)上加入DNLA培養(yǎng)，分為DNLA低劑量組（DNLA濃度0.00025ng/ml）、DNLA中劑量組（DNLA濃度0.0025ng/ml）和DNLA高劑量組（DNLA濃度0.025ng/ml）。觀察時(shí)間點(diǎn)為12h、24h、36h。采用MTT法檢測(cè)海馬神經(jīng)元活力，

3、放射免疫法檢測(cè)培養(yǎng)液中Aβ含量，EIASA法測(cè)定細(xì)胞BACE1蛋白含量。
　　 結(jié)果：1、海馬神經(jīng)元活力：正常對(duì)照組和溶媒對(duì)照組各組間細(xì)胞活力無顯著差異，（P>0.05）；與正常對(duì)照組和溶媒對(duì)照組比較，低氧低糖組各時(shí)間點(diǎn)海馬神經(jīng)元活力顯著降低，顯著有差異性（P<0.01）。與低氧低糖組比較，DNLA干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)海馬神經(jīng)元活力均明顯提高，差異有顯著性（P<0.01）。2.BACE1和Aβ放免測(cè)定結(jié)果：與正常對(duì)照組和溶媒對(duì)照組比較

4、，低氧低糖12h、24h、36h組BACE1和Aβ含量顯著升高，差異有顯著性（P<0.01）；低氧低糖12h、24h、36h組組內(nèi)比較，BACE1和Aβ濃度隨時(shí)間增加持續(xù)顯著升高，具有顯著性差異（P<0.05）。與各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)低氧低糖組比較，DNLA干預(yù)組Aβ含量顯著降低（P<0.01）。
　　 結(jié)論：1、低氧低糖培養(yǎng)可顯著損害海馬神經(jīng)元，提高海馬神經(jīng)元BACE1及Aβ的含量。2、DNLA可以減輕低氧低糖培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的損害，