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1、目的: 本實驗以6-OHDA作用于PC12細(xì)胞建立帕金森病多巴胺能神經(jīng)元的細(xì)胞模型,研究在加入NGF后JNK蛋白的表達(dá)及活化情況與凋亡的關(guān)系,探討帕金森病的發(fā)病機制,并為其治療提供理論依據(jù)。 方法: (1)利用MTT法檢測受不同濃度6-OHDA作用24小時及不同處理組PCI2細(xì)胞的吸光度值(OD值),計算其存活率。 (2)以Hoechst33342染色不同分組的PC12細(xì)胞,在熒光顯微鏡下觀察凋亡的形態(tài),
2、證明凋亡細(xì)胞的存在。 (3)以流式細(xì)胞分析法(FCA法)檢測不同處理組PC12細(xì)胞的凋亡峰面積與總峰面積,計算其凋亡率。 (4)以免疫印跡法檢測不同處理組PC12細(xì)胞的JNK蛋白及磷酸化JNK蛋白的光密度值(OD值),計算JNK的活化比例。 結(jié)論: (1)6-OHDA可降低PC12細(xì)胞的存活率;單獨加入NGF不能提高PC12細(xì)胞的存活率;NGF不能提高受6-OHD作用的PC12細(xì)胞的存活率。 (2
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