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1、膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的顱內(nèi)腫瘤,約占顱內(nèi)腫瘤的40%[1-2],盡管一些治療方法包括手術(shù)治療、放射療及化療有很大進(jìn)展,但是膠質(zhì)瘤病人特別是惡性膠質(zhì)瘤的預(yù)后仍然很差[3-6]。迫切需要尋求有效的非手術(shù)的治療方法[7-10]。隨著腫瘤分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)的研究進(jìn)展,對(duì)膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)的深入,以及)NA重組和基因轉(zhuǎn)染技術(shù)的發(fā)展,使膠質(zhì)瘤基因治療成為可能[11-13]。這些研究雖處于發(fā)展階段,但表現(xiàn)了良好的前景[14-15,17-20]。本研究采
2、用新型的自殺基因系統(tǒng)CYP2B1/IFOgenesystem對(duì)膠質(zhì)瘤進(jìn)行體外治療取得較好結(jié)果,并對(duì)療效和機(jī)制進(jìn)行了探討。 一、CYP2B1新型自殺基因的真核表達(dá)載體的構(gòu)建和瞬時(shí)表達(dá) 目的:構(gòu)建一種新型的CYP2B1自殺基因表達(dá)載體并檢測(cè)其在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)。 結(jié)論:CMV啟動(dòng)子調(diào)控的CYP2B1真核基因表達(dá)載體是腫瘤基因治療中一種有效的治療載體。 二、三種不同啟動(dòng)子調(diào)控下CYP2B1基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建
3、及表達(dá) 目的:分別構(gòu)建巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus,CMV)通用啟動(dòng)子和CMV雜合啟動(dòng)子[HRE]CMV調(diào)控的CYP2B1基因表達(dá)載體并檢測(cè)、分析二者表達(dá)的特點(diǎn)。 結(jié)論:兩種CYP2B1基因表達(dá)載體是膠質(zhì)瘤基因治療研究中新型、高效的表達(dá)載體,p[HRE]CMV/CYP2B1在三種膠質(zhì)瘤細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了較強(qiáng)的表達(dá)。 三、CYP2B1/IFO系統(tǒng)治療膠質(zhì)瘤的殺傷作用 目的:探討CYP2B1/IfO自
4、殺基因系統(tǒng)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的殺傷作用。 結(jié)論:CYP2B1/IFO系統(tǒng)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的殺瘤效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的自殺基因系統(tǒng),可以將其應(yīng)用于膠質(zhì)瘤基因治療,尤其是體內(nèi)治療。 通過(guò)以上研究得出以下結(jié)論: 1.成功構(gòu)建CYP2B1基因表達(dá)系統(tǒng)。 2.在體外p[HRE]CMV/CYP2B1啟動(dòng)子調(diào)控下CYP2B1可實(shí)現(xiàn)較強(qiáng)的表達(dá)。 3.CYP21/IFO系統(tǒng)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞有很好的殺傷作用。pCMV/CYP2B1an
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