2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討圓柱瘤基因CYLD的上調(diào)表達通過Fas信號途徑誘導(dǎo)對肺癌細胞殺傷的結(jié)果及相關(guān)機制。
   方法:收集5例患者肺腺癌手術(shù)標本,癌組織作為實驗組,自身癌旁組織作為對照組,實時熒光定量PCR進行CYLD基因表達分析,并進行統(tǒng)計學(xué)檢驗;肺癌細胞株A549、H460分別進行FLAG-CYLD質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,同樣采取實時熒光定量PCR對轉(zhuǎn)染效果進行分析,并建立穩(wěn)定表達FLAG-CYLD的A549、H460細胞株;mFasL蛋白與轉(zhuǎn)染前后

2、的A549、H460細胞株進行培養(yǎng),時間為24小時,通過流式細胞分析Fas信號途徑對A549、H460細胞的殺傷情況;通過Co-IP及WB分析CYLD蛋白是否使Ub-RIP1蛋白去泛素化,后者是否進一步加入Fas信號誘導(dǎo)形成DISCⅡ,從而誘導(dǎo)對肺癌細胞(重點分析A549細胞)的殺傷。
   結(jié)果:在檢測的5例患者肺腺癌手術(shù)標本中,癌組織和癌旁正常組織均有CYLD表達,但對照組為實驗組的2.53倍,并有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)

3、;轉(zhuǎn)染后CYLD基因在A549、H460細胞的表達較轉(zhuǎn)染前分別高1.40、1.83倍;與mFasL蛋白共培養(yǎng)的A549、H460細胞,其死亡均較轉(zhuǎn)染前顯著增加,但主要表現(xiàn)在壞死而并非凋亡的增加;肺癌細胞A549壞死水平的Co-IP及WB分析表明1)RIP1蛋白與CYLD蛋白、caspase-8蛋白之間均相互作用,2)RIP1蛋白與自身同源的另外一種蛋白RIP3結(jié)合,其作用在caspase抑制劑zVAD-fmk預(yù)處理后的肺癌細胞A549細

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