高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇對失血性休克大鼠各器官細(xì)胞HO-1 mRNA表達(dá)及凋亡的干預(yù)研究.pdf

1、研究背景： 失血性休克是創(chuàng)傷早期最常見的死亡原因，以全身微循環(huán)灌流量急劇銳減、細(xì)胞普遍缺氧和重要器官遭受損害為特征的病理過程，即微循環(huán)障礙導(dǎo)致細(xì)胞線粒體氧供受損，也是細(xì)胞水平的一種急性營養(yǎng)代謝障礙。失血性休克的病理生理變化和救治方法的研究一直是創(chuàng)傷學(xué)研究中的熱點(diǎn)問題。 目前，使用高滲氯化鈉溶液(7.5％)作為復(fù)蘇液的概念已被公認(rèn)并獲得進(jìn)一步闡述，近年來，不少研究表明，高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇失血性休克過程中尚具有一些獨(dú)特的作用

2、機(jī)制，如具有良好的免疫調(diào)理功能、能減輕缺血/再灌注引起的組織器官損傷、有效地改善微循環(huán)等，十分值得關(guān)注。 血紅素氧合酶-1(HO-1)，是誘導(dǎo)型酶，在抗氧化應(yīng)激損傷、減輕缺血/再灌注損傷等方面具有重要的作用。 本研究將通過定量檢測和比較假手術(shù)組(Sham組)、等滲鹽水復(fù)蘇組(NS組)和高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇組(HTS組)大鼠的心、肝、肺、腎和小腸黏膜等器官細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)及細(xì)胞凋亡發(fā)生情況，從而在分子生物學(xué)水平探討高

3、滲氯化鈉溶液復(fù)蘇失血性休克的救治療效和作用機(jī)制。 方法： 本研究將21只SD大鼠制作成重度失血性休克模型，根據(jù)院前期不同的復(fù)蘇液體隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組)、高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇組(HTS組)和等滲鹽水復(fù)蘇組(NS組)，每組7只，采用SYBRGreenI實(shí)時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和流式細(xì)胞儀FITC-AnnexinV/PI熒光染色法，定量檢測各組大鼠心、肝、肺、腎和小腸黏膜等器官細(xì)胞的HO-1mRNA表達(dá)及細(xì)

4、胞凋亡發(fā)生情況，并加以統(tǒng)計(jì)學(xué)比較和分析。 結(jié)果： 1、在該重度失血性休克大鼠模型中，等滲鹽水和高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇均可立即產(chǎn)生有效的復(fù)蘇作用，迅速改善大鼠的血流動力學(xué)狀態(tài)，且維持平穩(wěn)。 2、NS組和HTS組大鼠經(jīng)失血性休克/復(fù)蘇后，各器官的細(xì)胞凋亡發(fā)生率均明顯增高，其中以小腸黏膜和肺尤為明顯。與Sham比較，NS組大鼠的心、肝、肺、腎、小腸黏膜等器官細(xì)胞凋亡率均明顯增高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.

5、05)。HTS組大鼠的肺和小腸黏膜的細(xì)胞凋亡率也明顯增高，與Sham組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。此外，NS組大鼠的心、肺和小腸黏膜等器官的細(xì)胞凋亡發(fā)生率均較明顯高于HTS組大鼠，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。 3、失血性休克/復(fù)蘇能誘導(dǎo)大鼠各器官細(xì)胞增加HO-1mRNA的表達(dá)。但與Sham組比較，僅HTS組大鼠肝、腎等器官細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均=0.013)。

6、4、經(jīng)過失血性休克和復(fù)蘇后，NS組和HTS組大鼠肺細(xì)胞和小腸黏膜細(xì)胞的HO-1mRNA表達(dá)和細(xì)胞凋亡之間存在著明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： 在該重度失血性休克大鼠模型，與等滲鹽水復(fù)蘇比較，高滲氯化鈉溶液復(fù)蘇能更有效地減少失血性休克/復(fù)蘇后各器官細(xì)胞凋亡的發(fā)生率和誘導(dǎo)細(xì)胞HO-1mRNA的表達(dá)增加，可能有助于更好地保護(hù)機(jī)體細(xì)胞和維持器官功能狀態(tài)，從而改善預(yù)后。誘導(dǎo)HO-1基因的過表達(dá)和減少細(xì)胞凋亡的發(fā)生率可能是高滲氯化鈉溶液