血管鈉肽預(yù)防碾壓撕脫皮瓣繼發(fā)壞死的機(jī)制研究.pdf

1、背景：皮膚撕脫傷是整形外科常見的創(chuàng)傷之一，撕脫組織在早期往往有血液循環(huán)并保持一定的活力但術(shù)后逐漸發(fā)生組織栓塞壞死，防治撕脫皮瓣的繼發(fā)壞死已成為該領(lǐng)域的主要難點(diǎn)。近期研究顯示血管鈉肽有可能拮抗撕脫皮瓣繼發(fā)壞死病理生理機(jī)制中絕大部分的損傷因素，本實(shí)驗(yàn)探討血管鈉肽是否可以預(yù)防碾壓撕脫皮瓣的繼發(fā)壞死以及其可能的機(jī)制，以期為臨床提供一個(gè)效果顯著的治療手段。
　　 方法：39只8周齡SD大鼠隨機(jī)分成3組（每組n=13）。用西京醫(yī)院整形外科研

2、究所研制的小型化皮膚撕脫傷模型機(jī)，將各只大鼠背部掀起的3cm×9cm任意皮瓣進(jìn)行碾壓撕脫（壓力2.0～2.5kg重復(fù)三次）制作碾壓撕脫皮瓣模型。組A：給予生理鹽水1ml/kg腹腔注射（陰性對(duì)照），組B：給予血管鈉肽0.1mg/kg靜脈注射，組C：給予地塞米松5mg/kg腹腔注射（陽(yáng)性對(duì)照），各組分別在術(shù)后2h、1d、2d、3d給藥；在術(shù)后12h、1d、2d、3d采集血清。術(shù)后7d觀察各組皮瓣成活面積。各組收集的血清用于研究血管鈉肽的作用

3、機(jī)制：在Transwell雙層細(xì)胞培養(yǎng)小室的半透膜上培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，待細(xì)胞長(zhǎng)成單層融合狀態(tài)，分別用各組大鼠血清孵育刺激后，用羅丹明標(biāo)記的右旋糖酐（熒光大分子物質(zhì)）檢測(cè)血管鈉肽對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響；培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)各組大鼠血清孵育刺激后TUNEL法檢測(cè)血管鈉肽對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響；將各組大鼠血清作為誘導(dǎo)劑與正常大鼠靜脈血混合后，血小板聚集儀檢測(cè)血管鈉肽對(duì)全血血小板聚集的影響；正常大鼠的血小板、白細(xì)胞分離后分別用CFSE和DiD熒光標(biāo)

4、記，混合后用各組大鼠血清刺激，行流式細(xì)胞儀分析，檢測(cè)血管鈉肽對(duì)白細(xì)胞-血小板黏附的影響。
　　 結(jié)果：各組皮瓣存活面積：組A37.42±+4.36％，組B49.96±2.32％，組C43.16±4.13％；各組內(nèi)皮細(xì)胞通透性改變：組A6.65±0.09ug/ml，組B5.50±0.11ug/ml，組C5.95±0.09ug/ml；各組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的改變：組A40.34±0.13，組B18.63±0.23，組C22.03±0.16

5、；各組血小板聚集的改變：time=12h組A10.5±0.58ohm，組B6.25±+0.50ohm，組C7.75±0.50ohm；time=1d組A17.75±0.50ohm，組B9.75±0.50ohm，組C14.0±0ohm；time=2d組A24.0±1.15ohm，組B11.75±0.50ohm，組C15.75±0.50ohm；time=3d組A33.5±1.73ohm，組B16.5±0.57ohm，組C21.75±0.50o