饑餓狀態(tài)下糞腸球菌生物膜形成機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文饑餓狀態(tài)下糞腸球菌生物膜形成機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：劉紅艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：凌均棨20100508中山大學(xué)博士學(xué)位論文 饑餓狀態(tài)下糞腸球菌生物膜形成機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究下糞腸球菌生物膜的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制。第一章饑餓狀態(tài)下糞腸球菌生物膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)目的：獲得糞腸球菌單菌種生物膜，探討?zhàn)囸I期糞腸球菌所形成生物膜的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。方法：誘導(dǎo)糞腸球菌進(jìn)入對(duì)數(shù)期、靜止期和饑餓期，體外培養(yǎng)獲得糞腸球菌單菌種生物膜

2、。采用激光共聚焦掃描顯微鏡、掃描電鏡、活菌菌落計(jì)數(shù)法結(jié)合使用C O M S 即汀生物膜定量分析軟件，探討?zhàn)囸I期糞腸球菌形成的生物膜內(nèi)可培養(yǎng)細(xì)菌總數(shù)、生物膜厚度、生物量、粗糙度等形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。結(jié)果：饑餓期糞腸球菌可以在牙本質(zhì)等材料表面形成生物膜，經(jīng)歷粘附期、共聚期發(fā)展為三維網(wǎng)絡(luò)或片狀結(jié)構(gòu)。在粘附材料和生物膜膜齡等因素固定的情況下，饑餓期糞腸球菌形成的生物膜內(nèi)可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量顯著少于對(duì)數(shù)期和靜止期細(xì)菌形成的生物膜( 腳．0 5 ) 。在牙本質(zhì)

3、表面，饑餓期糞腸球菌形成的生物膜厚度、生物量與對(duì)數(shù)期和靜止期無(wú)明顯差異( p > O ．0 5 ) ，生物膜粗糙度大于對(duì)數(shù)期和靜止期，且與靜止期生物膜差異顯著( 薩O ．0 5 ) ，提示饑餓期生物膜均質(zhì)性較差。結(jié)論：饑餓期糞腸球菌可以在牙本質(zhì)等多種材料表面形成生物膜，具有生物膜形成的典型的發(fā)展階段和三維網(wǎng)絡(luò)或片狀結(jié)構(gòu)。生物膜內(nèi)可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量較少，表面不規(guī)則，均一性較差。表明饑餓期糞腸球菌可通過(guò)形成生物膜維持存活和致病性，借助生物

4、膜結(jié)構(gòu)的改變?cè)黾訝I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)以適應(yīng)內(nèi)、外環(huán)境。關(guān)鍵詞：糞腸球菌，生物膜，饑餓，結(jié)構(gòu)第二章饑餓狀態(tài)下糞腸球菌生物膜的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究目的：采集浮游狀態(tài)下不同生理時(shí)期的糞腸球菌形成的4 8 h 生物膜細(xì)菌的拉曼光譜，從分子水平探討?zhàn)囸I期糞腸球菌形成生物膜的過(guò)程中生物大分子的構(gòu)象變化。方法：獲得對(duì)數(shù)期、靜止期和饑餓期糞腸球菌所形成的4 8 h 生物膜細(xì)胞，采用顯微共焦拉曼光譜檢測(cè)技術(shù)采集拉曼光譜并轉(zhuǎn)換為A S C I I 數(shù)據(jù)，應(yīng)用M i c