干擾素γ誘導蛋白10基因與腫瘤抗原修飾樹突狀細胞抗前列腺癌實驗研究.pdf

1、目的:1.構建干擾素γ誘導蛋白10(IFN-γinducible protein-10,IP-10)真核表達質粒(IP-10/pcDNA3.1)并大量制備.2.建立從小鼠骨髓前體細胞中分離、培養(yǎng)和擴增樹突狀細胞(dendritic cell,DC)的方法;研究DC發(fā)育、分化和成熟過程中形態(tài)、結構以及免疫生物學特性的改變;探討影響DC增殖、分化的有關因素.3.將RM-1前列腺癌細胞的裂解產(chǎn)物(Lysate)和IP-10基因共同修飾DC,構

2、建前列腺癌DC瘤苗(IP-10/Lysate-DC);體內、外實驗檢測該瘤苗抗前列腺癌免疫治療作用及免疫保護作用.結論:1.所構建的IP-10/pcDNA3.1表達質粒正確.2.小鼠骨髓單個核細胞在細胞因子GM-CSF和IL-4誘導下,通過手法篩選,能擴增獲得大量功能性DC.GM-CSF是DC生長的必須因子,GM-CSF和IL-4聯(lián)合應用,可增加DC的得率,增強DC的免疫功能.3.通過脂質體轉染法將IP-10/pcDNA3.1導入DC,

3、獲得有效的IP-10表達,轉染DC的上清對T淋巴細胞有顯著趨化作用.4.RM-1前列腺癌細胞裂解產(chǎn)物和IP-10基因共同修飾DC所構建的前列腺癌DC瘤苗(IP-10/Lysate-DC),能夠明顯刺激T細胞的增殖,所誘導的特異性CTL分泌IL-2和INF-γ能力增強,對RM-1細胞具有顯著殺傷作用.5.將IP-10/Lysate-DC瘤苗回輸體內,可產(chǎn)生抗前列腺癌免疫治療作用,荷瘤小鼠腫瘤生長減慢,生存期延長;腫瘤組織出現(xiàn)壞死和炎細胞浸