腺病毒介導的葡萄糖轉(zhuǎn)運體3對大鼠PC12細胞缺氧-再灌注損傷的基因治療.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗利用腺病毒載體介導外源性基因葡萄糖轉(zhuǎn)運體3(Glucosetransporter3,GLUT3)轉(zhuǎn)染大鼠PC12細胞探討缺氧—再灌注氧損傷時Ad-GLUT3對PC12細胞的保護情況及抗凋亡機制。 研究方法和結(jié)果:在HEK—293細胞內(nèi)大量擴增腺病毒,濃縮,純化并轉(zhuǎn)染大鼠嗜鉻瘤細胞(PC12)證明它具有感染活性和表達活性。攜帶綠色熒光蛋白(greenfluoresecentprotein,GFP)的重組腺病毒Ad-GFP感染

2、大鼠嗜鉻瘤細胞(PC12)的實驗表明,腺病毒對PC12細胞有較高的轉(zhuǎn)染率,而且毒性較低。在建立大鼠嗜鉻瘤細胞(PC12)缺氧—再灌注氧損傷模型的基礎上,使用Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染PC12細胞,流式細胞儀法和TUNEL法進行凋亡分析顯示,Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染組的凋亡率較對照組明顯降低(P<0.05),使用同位素放射的方式分析葡萄糖代謝情況,Ad-GLUT3轉(zhuǎn)染組的葡萄糖吸收率較對照組明顯提高(P<0.05)。本實驗也使用Western-Bl

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