一株高產(chǎn)酵母突變株菊糖酶的生產(chǎn)和酒精發(fā)酵的研究.pdf

1、菊粉(Inulin)是一種廣泛存在于菊科植物如菊芋(Jerusalern artichoke)等根部或塊莖中的一種貯存性多糖，自然界中儲(chǔ)量非常豐富，是生產(chǎn)果糖糖漿、低聚果糖、液體燃料酒精等的優(yōu)質(zhì)可再生原材料。 菊粉酶(Inulinase)是一種主要來(lái)源于微生物的一類水解酶，能夠水解β-2，1-D-果聚糖糖苷鍵，學(xué)名為β-2，1-D-果聚糖酶(EC.3.2.1)，能夠?qū)⒕辗鬯鉃楣呛推咸烟?。但自然界中微生物所產(chǎn)的菊粉酶活力一般比

2、較低，酶產(chǎn)量也不高，不足以滿足工業(yè)生產(chǎn)的需要。本實(shí)驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)室保藏的一株季也蒙畢赤酵母(Pichia Guilliermondii)菌株1作為出發(fā)菌株，經(jīng)過(guò)紫外線結(jié)合氯化鋰誘變方法得到一株高產(chǎn)菊粉酶的突變株M-30，使其酶活力較原始菌株有了很大的提高。 同時(shí)還利用了表面響應(yīng)法(Surface Response Methodology，SRM)對(duì)得到的海洋季也蒙畢赤酵母突變株M-30的液體發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，得到的最終優(yōu)化條件為菊粉

3、2.0％(w/v)，酵母粉0.5％(w/v)，接種量2.0％(v/v)，28℃培養(yǎng)，初始pH6.5。在最優(yōu)條件下，突變株M-30的液體發(fā)酵酶活力達(dá)到了127.7 U/ml，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于原始出發(fā)菌株1在相同培養(yǎng)條件下的48.1U/ml。，并且發(fā)現(xiàn)該突變株所產(chǎn)的粗酶液能夠有效的將菊粉轉(zhuǎn)化為單糖。說(shuō)明通過(guò)紫外線結(jié)合氯化鋰誘變方法，使得突變株的酶活力有了明顯提高，并且具有較高的外切菊粉酶活性。 在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步利用突變株M-30所