TGF-β1對體外血管外膜成纖維細胞的影響.pdf

1、研究背景：轉化生長因子β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）是一種高度多效、多功能性的生長與分化因子。當血管損傷后，局部產(chǎn)生的細胞因子引起炎癥反應是血管再狹窄的主要原因。其中，TGF-β1在局部水平上調(diào)刺激血管平滑肌細胞（Vascular smooth muscle cell，VSMC）增殖和遷移、促進動脈外膜細胞的表型改變、增殖和遷移以及局部細胞外基質(zhì)（extracellular matrix

2、，ECM）蛋白的產(chǎn)生和沉積，從而促進血管再狹窄。ECM是組成間質(zhì)、上皮和血管中基質(zhì)的不溶性結構成分，是細胞存在和相互聯(lián)系的環(huán)境和媒介。基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9（matrix metalloproteinase，MMP-9）是降解ECM成份中的大分子蛋白的關鍵酶。實驗表明，病理情況下潛在型MMP-9被激活，其表達上調(diào)，在動脈粥樣硬化斑塊的形成、發(fā)展及破裂中發(fā)揮重要作用。過氧化物酶體增殖物激活型受體（peroxisome prolifter

3、ator-axtivated receptor，PPAR）是一類配體依賴的轉錄因子，可通過與靶基因的反應元件結合直接控制多種基因。已發(fā)現(xiàn)PPARγ對VSMC的增殖、遷移有抑制作用，有許多有益心血管的作用。近年的研究表明血管外膜也參與心血管病的發(fā)生。本研究通過體外實驗，研究TGF-β1在血管外膜成纖維細胞（adventitial fibroblasts，Afs）中的作用，及其對MMP-9的影響。PPARγ對TGF-β1誘導的血管外膜成纖維

4、細胞及MMP-9中的影響。 目的：本研究觀察TGF-β1在體外對Afs中表型、增殖、遷移、及MMP-9的影響，分析其可能的機制。此外，用PPARγ激動劑羅格列酮對TGF-β1誘導的Afs進行干預，觀察其對TGF-β1誘導結果的影響，從而探求新的抑制血管再狹窄方法。 方法：體外培養(yǎng)SD（Sprague Dawley）大鼠胸主動脈Afs，應用免疫組化法、western blot法測細胞表型改變、MTT法測細胞增殖、Trans

5、well Chamber法測細胞遷移、real-time PCR、Western blot方法檢測基因、蛋白的表達及酶的活性。 結果： 1.TGF-β1可呈劑量和時間依賴性促進Afs平滑肌a2肌動蛋白（α-SM-actin）的表達，使其向肌成纖維細胞（myofibroblast，MF）表型轉變，繼而增加I型膠原的合成，與對照組相比有顯著意義，（P<0.05）。 2.TGF-β1可呈劑量依賴性促進Afs的增殖和遷移

6、，TGF-β1可劑量和時間依賴性增加MMP-9 mRNA表達，增加MMP-9的活性，與對照組相比有顯著意義，（P<0.05）。 3.PPAR-γ羅格列酮可呈劑量依賴性抑制TGF-β1誘導Afs的表型轉變、I型膠原的合成，以及增殖和遷移，與對照組相比有顯著意義（P<0.05）。 4.PPAR-γ羅格列酮可呈劑量依賴性抑制TGF-β1誘導產(chǎn)生MMP-9活性，抑制MMP-9 mRNA，與對照組相比有顯著意義，（P<0.05）。