PPAR-γ激動劑干預(yù)血管外膜成纖維細(xì)胞膠原合成和增殖作用.pdf

1、研究背景：過氧化物酶體增殖物激活受體（Peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR ）γ激動劑目前用來增強糖尿病患者胰島素敏感性，對于糖耐量減退及其它與胰島素抵抗有關(guān)的疾病，如高血壓，動脈粥樣硬化等都有明顯的治療作用。對于PPAR-γ激動劑研究多集中于單核細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，可產(chǎn)生抗炎，抑制內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長、遷移等作用。近年來血管外膜在血管重構(gòu)中的作用日益受到重視，血管外

2、膜成纖維細(xì)胞（vascular adventitial fibroblasts，VAF）通過增殖、遷移以及合成細(xì)胞外基質(zhì)參與血管重構(gòu)過程。 PPAR-γ激動劑是否能夠調(diào)節(jié)VAF的這些作用，目前尚未見報道。這方面的研究可能對PPAR-γ激動劑防治血管重構(gòu)提供重要理論指導(dǎo)。 目的：闡明PPAR-γ激動劑調(diào)節(jié)AngII誘導(dǎo)的VAF 膠原合成和增殖作用。 方法：體外培養(yǎng)大鼠胸主動脈VAF。采用蛋白免疫印跡法檢測細(xì)胞I型膠原表達，

3、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)產(chǎn)生，電泳遷移率實驗檢測轉(zhuǎn)錄因子AP-1和NF-КB激活；MTT檢測VAF增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期，逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測PPAR-γ受體mRNA表達。 結(jié)果： 1.PPAR-γ激動劑 15d-PGJ2和吡格列酮預(yù)處理細(xì)胞后可以抑制Ang II誘導(dǎo)的VAF I 型膠原合成以及ROS產(chǎn)生。用抗氧化劑NAC預(yù)處理細(xì)胞同樣可抑制I型膠原的合成。

4、AngII可呈劑量和時間依賴性抑制VAF過氧化氫酶（catalase，CAT）表達和活性。15d-PGJ2和吡格列酮可逆轉(zhuǎn)AngII對CAT的抑制作用。 AngII可激活氧化還原轉(zhuǎn)錄因子NF-КB和AP-1，15d-PGJ2和吡格列酮可以抑制NF-КB的激活，但是對AP-1無明顯作用。 2.AngII可刺激VAF增殖，AT1 R阻滯劑氯沙坦可完全抑制Ang II誘導(dǎo)的VAF增殖，而AT2 R阻滯劑PD123319對AF遷移無明

5、顯抑制作用。吡格列酮呈劑量依賴性的抑制AngII誘導(dǎo)的VAF增殖。VAF表達PPAR-γ受體mRNA，PPAR-γ受體拮抗劑GW9662可呈劑量依賴性拮抗吡格列酮對細(xì)胞增殖的抑制作用。吡格列酮可以使VAF靜止于G0/G1期，阻止細(xì)胞進入S期并降低細(xì)胞增殖指數(shù)。 結(jié)論： PPAR-γ激動劑15d-PGJ2和吡格列酮可以抑制Ang II誘導(dǎo)的VAF I 型膠原表達，這一作用可能是通過增強CAT表達和活性清除過多的ROS以及阻