骨髓間充質干細胞移植聯(lián)合洛伐他汀緩釋支架治療大鼠心肌梗死的實驗研究.pdf

1、第一部分洛伐他汀-聚乳酸-羥基乙酸共聚物緩釋支架的制備及體外評價
　　 目的:制備洛伐他汀-聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)緩釋支架，初步評價其作為一種心肌組織工程支架材料的可行性。
　　 方法:溫度梯度誘導相分離法制備PLGA支架和洛伐他汀-PLGA緩釋支架，通過掃描電鏡觀察支架超微結構，縫合拉力試驗檢測其橫向及縱向力學性能，進行水解試驗評價其降解性能。建立大鼠皮下包埋模型，分別于1周、1月取材后進行H&E染色評價其

2、組織相容性。全骨髓法獲取骨髓間充質干細胞，將第3代骨髓間充質干細胞以4×106/cm2的濃度種植于支架材料上，通過Hoechst染色和掃描電鏡觀察骨髓間充質干細胞在支架材料上的生長情況。
　　 結果:
　　 1、洛伐他汀-PLGA支架掃描電鏡下呈取向排列，內部互相貫通，支架孔隙豐富利于細胞生長。
　　 2、洛伐他汀-PLGA支架材料力學性能穩(wěn)定，其縱行縫合強度與PLGA支架相似(4.8±0.4N vs5.0±0.

3、5N，p＞0.05)。
　　 3、洛伐他汀-PLGA支架從第6周起降解速度加快，至第8周時其質量殘余率小于PLGA支架(78.8±0.8％ vs81.9±1.6％，P＜O.01)。
　　 4、洛伐他汀-PLAG支架植入大鼠皮下1周及1月時未見明顯炎癥反應，支架全層出現(xiàn)大量毛細血管，大鼠自身細胞沿支架材料縱向生長。
　　 5、Hoechst染色、掃描電鏡顯示洛伐他汀-PLGA支架上骨髓間充質干細胞堆疊樣生長，鋪滿支

4、架。
　　 結論:
　　 1、洛伐他汀-PLGA支架滿足心肌組織工程形態(tài)學和力學性能要求，并具備降解和藥物緩釋性能;
　　 2、洛伐他汀-PLGA緩釋支架具良好的細胞和組織相容性，骨髓間充質干細胞能在支架上良好生長，它可作為心肌組織工程支架材料進行體內安全的移植。
　　 第二部分骨髓間充質干細胞移植聯(lián)合洛伐他汀緩釋支架治療大鼠心肌梗死的實驗研究
　　 目的:研究組織工程洛伐他汀-PLGA緩釋支架治

5、療大鼠慢性心肌梗死的效果及可能機制。
　　 方法:通過前降支結扎法建立大鼠的心肌梗死模型。3周后將篩選合格的動物模型隨機分為5組:對照組(Con組)僅再次開胸;PLGA支架組（P組），洛伐他汀-PLGA支架組(LP組)，組織工程PLGA支架組（TP組），組織工程洛伐他汀-PLGA支架組(TLP組)。手術1，4，8周后，超聲心動圖和血流動力學評價心室重構和心臟功能，Masson染色檢測心肌纖維化情況，免疫組化染色分析梗死區(qū)TGF-

6、β1、MMP-2，9、TNF-α的表達和新生毛細血管密度，普通PCR檢測骨髓間充質干細胞(BMSCs)存活和免疫熒光法檢測其分化情況。
　　 結果:與Con組相比，實驗終點各組左室射血分數(shù)、左室短軸收縮率、左室收縮末期壓力、左室壓最大升降速率都有所改善(P＜0.01)，而且TLP組改善程度好于其他實驗組(P＜0.05)。Masson染色顯示TLP組心肌纖維化程度較其他組輕，且免疫組化染色顯示TLP組TGF-β1、MMP-2，9、