主動(dòng)外排系統(tǒng)AcrAB-TolC介導(dǎo)的大腸桿菌多重耐藥性的研究.pdf

1、大腸桿菌是畜禽的主要致病菌。大腸桿菌對(duì)多種抗生素耐藥主要與菌體中存在的主動(dòng)外排系統(tǒng)(外排泵)有關(guān)。一般認(rèn)為AcrAB-TolC外排泵是最主要的外排泵。它的作用底物十分廣泛，能夠排出多種抗生素、化療試劑、洗滌劑和染料類，它的高水平表達(dá)，表現(xiàn)出對(duì)多種化合物的耐受甚至高水平耐受。 從山東省不同地市多家雞場(chǎng)分離出176株雞源大腸桿菌，按NCCLS推薦的紙片擴(kuò)散法測(cè)定了其對(duì)20種抗菌藥物的敏感性。結(jié)果表明，細(xì)菌耐藥性嚴(yán)重，以多重耐藥為主，

2、75％的分離菌耐受多于9種抗菌藥物。從中選擇6株不同耐藥水平的多重耐藥大腸桿菌，采用平皿二倍稀釋法對(duì)其進(jìn)行最低抑菌濃度測(cè)定，結(jié)果表明多重耐藥的水平相當(dāng)嚴(yán)重。 應(yīng)用瓊脂稀釋法檢測(cè)大腸桿菌質(zhì)控株和耐藥株在加入主動(dòng)外排抑制劑碳酰氰間氯苯腙(CCCP)后對(duì)環(huán)丙沙星、恩諾沙星、四環(huán)素的最低抑菌濃度(MIC)變化情況，以此探討耐藥大腸桿菌中是否存在主動(dòng)外排系統(tǒng)。結(jié)果顯示：在加入CCCP后，大腸桿菌質(zhì)控株對(duì)三種抗菌藥物的MIC無變化，多數(shù)耐藥

3、株對(duì)四環(huán)素MIC變化不大，而CCCP可使耐藥株分別對(duì)環(huán)丙沙星和恩諾沙星的MIC變化較大，其中耐藥菌S26對(duì)這兩種藥物的MIC均減小8倍。 研究環(huán)丙沙星和恩諾沙星在臨床耐藥株及質(zhì)控株ATCC25922中的蓄積動(dòng)力學(xué)及能量抑制劑酰氰間氯苯腙CCCP(Carbonglcyanidem-chlorlpheyhydrazone)的影響。結(jié)果表明，CCCP的作用不同程度地增加了耐藥株和質(zhì)控株ATCC25922對(duì)環(huán)丙沙星、恩諾沙星的攝入量。在

4、質(zhì)控株ATCC25922，不論有無CCCP的存在，菌體內(nèi)環(huán)丙沙星、恩諾沙星的濃度隨攝取時(shí)間而遞增且保持較耐藥株高的穩(wěn)態(tài)濃度；在耐藥株S9、S26和S124當(dāng)有CCCP存在時(shí)菌體內(nèi)喹諾酮類藥物濃度隨攝取時(shí)間而遞增且保持較無CCCP存在時(shí)明顯高的穩(wěn)態(tài)濃度；但耐藥株S5和S77加入CCCP后菌體內(nèi)藥物的累積量變化不大。 通過RT-PCR檢測(cè)了標(biāo)準(zhǔn)株和臨床分離耐藥株的AcrA的mRNA，分析了受試菌的耐藥水平與AcrA的mRNA水平的相