鼻咽癌患者GPI-PLD活性及其表達(dá)水平的初步研究.pdf

1、目的： 1．通過(guò)研究正常人和鼻咽癌患者的糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D(GPI-PLD)的酶活性和酶促反應(yīng)的3-D圖，探索鼻咽癌患者該酶活性的變化情況及該酶促反應(yīng)的可能機(jī)制。 2．通過(guò)研究正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平，探尋鼻咽癌患者該酶活性變化的可能機(jī)制，為鼻咽癌的診斷、預(yù)后提供有效指標(biāo)。 方法： 1．采用我室自制的具完整GPI結(jié)構(gòu)的胎盤型堿性磷酸酶(PLAP)作底物進(jìn)行酶促反應(yīng)，

2、測(cè)定正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD的酶活性并應(yīng)用韓國(guó)新科有限公司生產(chǎn)的光電二極管紫外—可見光譜儀儀器研究了該酶的催化機(jī)理，并且利用該機(jī)所帶軟件作出3-D圖。 2．采用逆轉(zhuǎn)錄PCR (RT-PCR)檢測(cè)正常人和鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平，以RT-PCR結(jié)果的瓊脂糖電泳照片的積分光密度值(IA)比值代表GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1．正常人和鼻咽癌患者血清GPI-PLD的活性水

3、平(均以轉(zhuǎn)化底物百分比表示)分別為17.6％士2.7％和20.6％士2.4％，鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人血清GPI-PLD活性顯著增高(P<0.05)。并且其酶促反應(yīng)的3-D圖顯示有直觀差異。 2．RT-PCR檢測(cè)GPI-PLD mRNA的表達(dá)，結(jié)果表明正常人鼻咽上皮細(xì)胞中GPI-PLD mRNA瓊脂糖電泳照片的平均積分光密度比值(IA比值)是2.5259±0.5618，鼻咽癌患者鼻咽上皮細(xì)胞中GPI-PLDmR

4、NA瓊脂糖電泳照片的平均積分光密度比值(IA比值)是9.3522±5.2879，鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平比正常人鼻咽上皮細(xì)胞中GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平顯著性增高(P<0.05)。結(jié)論： 1．鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人顯著增高，其酶促反應(yīng)的3．D圖也與正常人有明顯差異，提示測(cè)定GPI-PLD活性可作為臨床診斷鼻咽癌的生化指標(biāo)。 2．鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表達(dá)水平