EBV與人鼻咽癌的基因表達譜并初步探討鼻咽癌轉(zhuǎn)移分子機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 本研究首先利用由oligo6.0，NCBIBlast和PrimerPremier5軟件去設(shè)計和篩選全EBV基因組cDNA探針，我們將這些探針的長度限定在300-600mer。然后，通過PCR和RT-PCR方法從B95-8細胞和NPC組織的基因組DNA和RNA中擴增這些探針，接著克隆入T/A克隆載體和測序鑒定。探針通過一對設(shè)計于載體多克隆兩端的引物進行PCR擴增。產(chǎn)物純化后，探針被打印在Corning玻片上。通過與Cy3標(biāo)記的B9

2、5-8細胞cDNA進行雜交反應(yīng)，B95-8細胞內(nèi)EBV基因表達被檢測。隨后，基因芯片結(jié)果采用了兩種方法分別進行了驗證。 進一步利用3組基因芯片數(shù)據(jù)，從腫瘤的血管生成、細胞的黏附、蛋白激酶、NEM1轉(zhuǎn)移抑制基因等方面去研究鼻咽癌的轉(zhuǎn)移機制，以及篩選與鼻咽癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因。HGF、BPAG1、VLA-2、CTSD、MMP1等基因能作為血管生成、黏附分子及其受體、蛋白激酶的代表基因，正向調(diào)控鼻咽癌細胞的轉(zhuǎn)移。而COL18A1、NEM1

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