鼻咽癌甲基化譜的建立.pdf_第1頁(yè)
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1、鼻咽癌傾向于表觀遺傳學(xué)疾病,鼻咽癌特異性腫瘤抑制基因的啟動(dòng)子區(qū)CpG島高甲基化導(dǎo)致其轉(zhuǎn)錄表達(dá)下調(diào)甚至沉默,喪失腫瘤抑制功能,成為鼻咽癌發(fā)病的重要機(jī)制。 為大規(guī)模篩選出鼻咽癌中因高甲基化而失活的腫瘤抑制基因,我們利用高通量的cDNA表達(dá)芯片技術(shù),以甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑聯(lián)合脫乙?;敢种苿┨幚肀茄拾┘?xì)胞株CNE2和HONE1,分別與未經(jīng)處理的細(xì)胞株進(jìn)行差異表達(dá)的基因的篩選。整合兩張芯片處理后表達(dá)上調(diào)的基因,再以具有CpG島為條件,初步篩

2、選出鼻咽癌甲基化譜389個(gè)基因。 挑選甲基化譜中4個(gè)基因FSTL1,MAEL,TFPI2和SPARC進(jìn)行驗(yàn)證。利用半定量RT-PCR檢測(cè)處理前后細(xì)胞中上述基因的表達(dá)改變情況。結(jié)果顯示這4個(gè)基因經(jīng)過(guò)5-aza-dC處理后不同程度的表達(dá)上調(diào),為鼻咽癌候選腫瘤抑制基因。 另外我們對(duì)感興趣的基因FSTL1進(jìn)行DNA甲基化的驗(yàn)證。發(fā)現(xiàn)鼻咽癌組織中FSTL1的表達(dá)水平顯著低于正常鼻咽組織水平;FSTL1基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島高甲基化可

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