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文檔簡介
1、目的:了解PCDH20基因在鼻咽癌細胞和組織中的表達和甲基化情況,從而分析基因表達與甲基化的關(guān)系。檢測去甲基化藥物作用后PCDH20基因的表達和甲基化,進一步說明基因表達與甲基化的關(guān)系。同時研究PCDH20基因在鼻咽癌中功能,了解基因的作用。
方法:用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、甲基化特異性PCR(MSP)檢測PCDH20基因在細胞和組織中的表達情況及甲基化情況。Aza和TSA作用鼻咽癌細胞后,RT-PCR檢測細胞的P
2、CDH20的表達,MSP檢測甲基化情況。采用細胞轉(zhuǎn)染技術(shù),流式細胞儀檢測細胞凋亡。
結(jié)果:PCDH20在鼻咽癌細胞中表達率0/9(0%),在正常鼻咽部組織中表達率10/11(90.9%),在鼻咽癌組織中表達率13/23(56.5%)。鼻咽癌組織中甲基化28/37(75.6%),正常鼻咽部組織中甲基化6/13(46.1%)。PCDH20基因在鼻咽癌細胞中的甲基化率7/9(77.8%),在正常鼻咽部組織中的甲基化率為2/13(15
3、.3%),在鼻咽癌組織中的甲基化率為28/37(75.6%)。去甲基化藥物作用鼻咽癌細胞中,PCDH20表達率4/4(100%),甲基化率0/4(4%)。轉(zhuǎn)染PCDH20的細胞凋亡率顯著高于對照組(P<0.05)
結(jié)論:PCDH20在鼻咽癌細胞和組織中均出現(xiàn)甲基化,出現(xiàn)甲基化則表達明顯下調(diào)或缺失,正常的鼻咽癌組織中出現(xiàn)甲基化的情況較少,說明PCDH20基因表達缺失或下調(diào)與基因的甲基化有關(guān)。去甲基化藥物可以使細胞甲基化缺失或下調(diào)
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