EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌中病毒潛伏期基因啟動子甲基化狀態(tài)的研究.pdf

1、EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是重要的DNA腫瘤病毒，屬人類皰疹病毒科γ皰疹病毒亞科成員，與人類多種惡性腫瘤密切相關(guān)。EBV相關(guān)胃癌(EBV-associated gastric carcinoma，EBVaGC)及鼻咽癌組織中病毒基因表現(xiàn)為限制性表達，可能與病毒利用表觀遺傳機制，尤其是利用DNA甲基化來調(diào)控病毒基因啟動子的活性。研究表明，EBV相關(guān)腫瘤組織中病毒可借甲基化沉默部分基因，導致相關(guān)蛋白表達水平的降

2、低，因而對槽主免疫系統(tǒng)的刺激也減弱，病毒借此來逃避宿主免疫攻擊，同時也提示針對病毒基因表觀改變的靶向去甲基化作用有可能成為治療EBV陽性腫瘤的新方法。
　　 目的：研究分析青島地區(qū)EBVaGC及鼻咽癌組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動子甲基化狀態(tài)。
　　 方法：選擇32例EBVaGC及20例EBV陽性鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)作為研究對象，以EBV陽性細胞系Raji，B95-8和A

3、kata作為對照，采用甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR，MSP)及亞硫酸氫鹽-基因組測序法(Bisulfite genomic sequencing，BGS)檢測分析其EBV核抗原編碼基因啟動子Cp，Wp和Qp以及EBV潛伏膜蛋白LMP1和LMP2A編碼基因啟動子的甲基化狀態(tài)。
　　 結(jié)果：①EBV陽性細胞系中EBV編碼基因啟動子甲基化狀態(tài)表現(xiàn)為：B95-8細胞系Cp未發(fā)生甲基化，Raji細胞

4、系Cp呈高甲基化，但在Akata細胞系同時檢測到甲基化和未甲基化的Cp。Raji和Akata細胞系Wp呈高甲基化，但在B95-8細胞系中則表現(xiàn)為部分未甲基。3種細胞系中均未檢測到Qp、LMP1p和LMP2Ap的甲基化。②EBVaGC及鼻咽癌腫瘤標本中EBV核抗原編碼基因啟動子的甲基化狀態(tài)與腫瘤細胞的潛伏感染類型基本一致：Cp和Wp呈高甲基化狀態(tài)，而Qp未發(fā)生甲基化。③EBVaGC和EBV陽性鼻咽癌組織中LMP1和LMP2A編碼基因啟動子