EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌中病毒潛伏期基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的研究.pdf

1、EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是重要的DNA腫瘤病毒，屬人類皰疹病毒科γ皰疹病毒亞科成員，與人類多種惡性腫瘤密切相關(guān)。EBV相關(guān)胃癌(EBV-associated gastric carcinoma，EBVaGC)及鼻咽癌組織中病毒基因表現(xiàn)為限制性表達(dá)，可能與病毒利用表觀遺傳機(jī)制，尤其是利用DNA甲基化來(lái)調(diào)控病毒基因啟動(dòng)子的活性。研究表明，EBV相關(guān)腫瘤組織中病毒可借甲基化沉默部分基因，導(dǎo)致相關(guān)蛋白表達(dá)水平的降

2、低，因而對(duì)槽主免疫系統(tǒng)的刺激也減弱，病毒借此來(lái)逃避宿主免疫攻擊，同時(shí)也提示針對(duì)病毒基因表觀改變的靶向去甲基化作用有可能成為治療EBV陽(yáng)性腫瘤的新方法。
　　 目的：研究分析青島地區(qū)EBVaGC及鼻咽癌組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)。
　　 方法：選擇32例EBVaGC及20例EBV陽(yáng)性鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)作為研究對(duì)象，以EBV陽(yáng)性細(xì)胞系Raji，B95-8和A

3、kata作為對(duì)照，采用甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR，MSP)及亞硫酸氫鹽-基因組測(cè)序法(Bisulfite genomic sequencing，BGS)檢測(cè)分析其EBV核抗原編碼基因啟動(dòng)子Cp，Wp和Qp以及EBV潛伏膜蛋白LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)。
　　 結(jié)果：①EBV陽(yáng)性細(xì)胞系中EBV編碼基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)表現(xiàn)為：B95-8細(xì)胞系Cp未發(fā)生甲基化，Raji細(xì)胞

4、系Cp呈高甲基化，但在Akata細(xì)胞系同時(shí)檢測(cè)到甲基化和未甲基化的Cp。Raji和Akata細(xì)胞系Wp呈高甲基化，但在B95-8細(xì)胞系中則表現(xiàn)為部分未甲基。3種細(xì)胞系中均未檢測(cè)到Qp、LMP1p和LMP2Ap的甲基化。②EBVaGC及鼻咽癌腫瘤標(biāo)本中EBV核抗原編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)與腫瘤細(xì)胞的潛伏感染類型基本一致：Cp和Wp呈高甲基化狀態(tài)，而Qp未發(fā)生甲基化。③EBVaGC和EBV陽(yáng)性鼻咽癌組織中LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子