超深低溫條件下較長冷凍時(shí)間對異體神經(jīng)移植再生的影響.pdf

1、目的:觀察超深低溫(-196℃)條件下較長冷凍時(shí)間對異體神經(jīng)移植再生的影響,尋找較長且相對有效的保存時(shí)限,使異體神經(jīng)移植免疫排斥反應(yīng)最小,再生效果最好,并逐步建立神經(jīng)組織庫模型,使之更好的服務(wù)于基礎(chǔ)研究和臨床治療。方法:分組,將120只雌性Wistar大鼠(體重280±30 g),按隨機(jī)原則分為取材組30只,其余90只每組15只分為對照組:A組(新鮮自體神經(jīng)移植組)、B組(新鮮異體神經(jīng)移植組)和實(shí)驗(yàn)組:C組(取材組神經(jīng)超深低溫冷凍保存3

2、周后移植組)、D組(取材組神經(jīng)超深低溫冷凍保存6周后移植組)、E組(取材組神經(jīng)超深低溫冷凍保存9周后移植組)、F組(取材組神經(jīng)超深低溫冷凍保存12周后移植組)。取材,將水合氯醛和蒸餾水按質(zhì)量分?jǐn)?shù)5:95配置為95％水合氯醛,甘油和蒸餾水按體積分?jǐn)?shù)1:1配置為50％甘油。用95％水合氯醛按0.7ml/100g腹腔注射將取材組Wistar大鼠麻醉,固定于動物實(shí)驗(yàn)臺上并備皮,于4組每組15根放于50％甘油的EP管中,而后置于超深低溫(-l96

3、℃)的液氮瓶中,根據(jù)不同冷凍時(shí)間要求進(jìn)行保存。神經(jīng)移植,A組:將坐骨神經(jīng)取下后立即原位移植于自體;B組:將坐骨神經(jīng)取下后立即兩兩交叉移植;C組:取材組神經(jīng)在超深低溫條件下冷凍3周后在常溫下用生理鹽水復(fù)溫后進(jìn)行異體移植;D組:取材組神經(jīng)在超深低溫條件下冷凍6周后在常溫下用生理鹽水復(fù)溫后進(jìn)行異體移植;E組:取材組神經(jīng)在超深低溫條件下冷凍9周后在常溫下用生理鹽水復(fù)溫后進(jìn)行異體移植;F組:取材組神經(jīng)在超深低溫條件下冷凍12周后在常溫下用生理鹽水

4、復(fù)溫后進(jìn)行異體移植。C、D、E、F組的異體神經(jīng)移植組按隨機(jī)原則進(jìn)行操作,神經(jīng)斷端按束膜縫合法用11-0尼龍線端端縫合4-6針,所有組別術(shù)后均不用藥物處理。指標(biāo)觀察,術(shù)后間隔一定時(shí)間觀察各組別大鼠術(shù)側(cè)部肢體的腫脹、運(yùn)動、足部糜爛、移植段神經(jīng)顏色、血循及周圍組織和它黏連情況;于術(shù)后3、6、9周分別從各組取5只大鼠做神經(jīng)電生理檢測,同時(shí)于術(shù)后第9周做光鏡、電鏡觀察。結(jié)果:從大體觀察上看,A、C、D組術(shù)后腫脹糜爛較輕,神經(jīng)修復(fù)速度快,功能恢復(fù)好