不同復(fù)溫方法對深低溫冷凍復(fù)合組織血管活性的影響.pdf

1、研究背景：隨著社會工業(yè)化和現(xiàn)代化的飛速發(fā)展，外傷造成斷肢（指）患者不斷增加。一部分患者由于全身多發(fā)傷病情不穩(wěn)定不能急診行再植手術(shù)，待病情穩(wěn)定后，斷肢（指）往往因?yàn)楸４婕夹g(shù)不過關(guān)已經(jīng)壞死，失去再植機(jī)會，這些患者往往喪失部分功能甚至生活自理能力，給社會和家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。如果離斷的肢體能妥善的保存，待患者病情平穩(wěn)后，仍可行斷肢（指）的再植，將為這部分患者帶來福音。此外，臨床上有采用同種異體組織成功移植的報道，我們希望將這些斷肢（指）成功保

2、存，并建立肢體庫，為肢體缺失的患者提供再植的機(jī)會。復(fù)合組織乃至整個肢體的保存一直是再生醫(yī)學(xué)及顯微外科領(lǐng)域的亟待解決的難題，主要表現(xiàn)在冷卻一復(fù)溫過程中冰晶的形成與聚集，而復(fù)溫過程中冰晶的再形成將對細(xì)胞造成致命的損傷；復(fù)合組織保存及移植能否成功血運(yùn)的建立是關(guān)鍵因素。本研究基于以上背景，擬采用3種復(fù)溫方法對低溫保存復(fù)合組織進(jìn)行解凍，通過觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞活性找出一種深低溫冷凍后復(fù)合組織解凍的最佳復(fù)溫方法，從而為復(fù)合組織的保存及移植提供一定的依據(jù)

3、。
　　 目的：比較3種不同復(fù)溫方法對深低溫冷凍的復(fù)合組織中血管活性的影響，找出一種對復(fù)合組織中血管損傷最小的復(fù)溫方法。
　　 方法：選用20只健康新西蘭大白兔隨機(jī)分成四組，切取雙側(cè)后肢，對照組為新鮮斷肢取血管，三個實(shí)驗(yàn)組肢體離斷后經(jīng)梯度降溫后置入液氮中保存7天。將肢體取出，分別采用37℃水浴復(fù)溫（A組）、空氣復(fù)溫（B組）、-20℃冰復(fù)溫（C組）方法進(jìn)行復(fù)溫。采用光鏡、免疫組化方法觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞活性，結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析

4、。
　　 結(jié)果：光鏡觀察,37℃水浴復(fù)溫組（A組）、空氣復(fù)溫組（B組）內(nèi)皮細(xì)胞大片脫落，平滑肌細(xì)胞變形；而C組內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞保存較好，更接近對照組；免疫組化檢測中,3種復(fù)溫方法血管內(nèi)皮中均可見VEGF呈斑片狀的弱表達(dá)，-20℃冰復(fù)溫組（C組）VEGF的表達(dá)更接近對照組，高于37C水浴復(fù)溫組（A組）及空氣復(fù)溫組（B組）(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.復(fù)合組織經(jīng)梯度降溫復(fù)溫后血管內(nèi)皮活性不同程度損傷