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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 研究大鼠體神經(jīng)-內(nèi)臟神經(jīng)吻合以及體神經(jīng)-體神經(jīng)吻合再生后agrin在脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中的表達(dá)及其差異,探討異類(lèi)神經(jīng)再生中參與突觸形成和維持的相關(guān)因子。
方法:建立大鼠體神經(jīng)-內(nèi)臟神經(jīng)吻合動(dòng)物模型和體神經(jīng)-體神經(jīng)吻合動(dòng)物模型,通過(guò)熒光染料逆行追蹤,標(biāo)記L4脊髓前角支配盆神經(jīng)節(jié)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(異類(lèi)神經(jīng)元)。流式細(xì)胞儀分選被標(biāo)記細(xì)胞,用實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定分選細(xì)胞中agrin的mRNA水平。用熒光染料順行追蹤結(jié)合免疫熒光標(biāo)
2、記盆神經(jīng)節(jié)處新的突觸。
結(jié)果:模型鼠吻合再生4個(gè)月后,體神經(jīng)能夠再生并替代內(nèi)臟神經(jīng)長(zhǎng)入盆神經(jīng)節(jié),并最終形成新的突觸結(jié)構(gòu)。在激光共聚焦顯微鏡下觀察到了這種結(jié)構(gòu)。應(yīng)用熒光染料逆行追蹤結(jié)合流式細(xì)胞分選技術(shù)能夠滿(mǎn)意分離出L4脊髓前角的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)得Agrin在各組分選神經(jīng)元中均有表達(dá),模型組中agrin表達(dá)水平較模型對(duì)照組和正常組有少許降低(P<0.05)。
結(jié)論: 異類(lèi)神經(jīng)再生長(zhǎng)入盆節(jié)后能夠形成新的
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