金屬硫蛋白(MT)的晝夜節(jié)律變化和SNT保肝機制的研究.pdf

1、第一部分金屬硫蛋白晝夜節(jié)律變化及性別差異
　　目的:明確金屬硫蛋白在昆明小鼠中表達的晝夜節(jié)律變化及性別差異。
　　 方法:成年昆明種小鼠48只，雌雄各半，適應性飼養(yǎng)兩周后分別于6:00、10:00、14:00、18:00、22:00、2:00六個時間點斷頭處死取肝、腎、血。采用RT-PCR方法檢測血、肝和腎中時鐘基因（Bmal1、Dbp、Cry1）及金屬硫蛋白基因(MT-1、MT-2)的表達，Western-blot及鎘

2、飽和法檢測MT蛋白變化。
　　 結果:MT-1、MT-2 mRNA在肝中呈明顯的晝夜節(jié)律變化，峰谷值可相差43倍，與時鐘基因Dbp表達模式相似，但與Bmal1相反。肝中MT蛋白亦呈晝夜節(jié)律變化。MT mRNA在腎、血中晝夜表達峰谷值可相差8倍。在峰值點18時，雌性小鼠肝、腎、血中的MT mRNA表達高于雄性小鼠。
　　 結論:MT基因及蛋白在小鼠肝、腎、血中的表達具有晝夜節(jié)律及性別差異。
　　 第二部分毛蒟提取物

3、(SNT)改善小鼠肝損傷的機制:SNT對MT和Nrf2通路的誘導
　　 目的:通過制備小鼠四氯化碳(CC14)和D.氨基半乳糖(D-Gal)急性肝毒性模型驗證毛蒟提取物(SNT)對肝的保護作用，并探討SNT的保肝機制:SNT對MT及Nrf2通路的誘導。
　　 方法:昆明雄性小鼠隨機分為空白組、溶媒組(0.5％ CMC)、SNT低劑量組(250mg·kg-1)、SNT中劑量組(500 mg·kg-1)、SNT高劑量組(10

4、00 mg·kg-1)、CC14模型組(20ul·kg-1)、D-Gal模型組(800 mg·kg-1)、SNT+CCl4組(SNT500 mg·kg-1+CCl4)、SNT+D-Gal(SNT500 mg·kg-1+D-Gal)。SNT給藥一周，CC14和D-Gal一次腹腔注射制備急性肝損傷動物模型。以血ALT、AST和肝組織HE染色等為指標，驗證毛蒟提取物的肝保護作用。并通過RT-PCR和Western-blot檢測Nrf2通路及M