乙型肝炎病毒合成e基因在畢赤酵母中的表達及產(chǎn)物免疫學特征的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩40頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的：合成適合畢赤酵母表達的乙型肝炎病毒(HBV)e抗原基因，在畢赤酵母中表達出高特異性和高免疫反應性的重組乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)。 方法：采用聚合酶鏈反應從含HBV全基因序列(adw)的質粒PHBV1中擴增出野生型e基因，在兩個不同的位點定向插入酵母表達載體pPICZαA，構建兩種重組質粒CZαA-eAg；采取基因搭橋法及Taq酶聚合反應，選用酵母偏愛的同義密碼子替換野生型e基因的部分密碼子，制備合成e基因(syne

2、Ag基因)，在兩個不同的位點定向插入pPICZαA酵母表達載體，構建兩種重組質粒CZαA-syneAg；SacI消化重組質粒，用電轉法將線性化的攜帶有野生型和合成e基因的四種重組pPICZαA分別轉化畢赤酵母菌株GS115，，篩選His+Muts表型轉化子，經(jīng)甲醇誘導表達HBeAg。 結果：酶切電泳及DNA測序證實野生型及合成e基因已正確克隆到表達載體中；聚丙烯酰胺凝膠電泳及ELISA顯示HBeAg在畢赤酵母中分泌表達，含CZα

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論