13-17羅伯遜易位豬成纖維細(xì)胞系的建立及鑒定.pdf

1、為了加強(qiáng)對(duì)13/17羅伯遜易位豬這一種質(zhì)資源的保護(hù)和進(jìn)一步研究，本文以初生13/17羅伯遜易位雜合子豬、純合子豬及正常核型家豬耳部皮膚組織為材料，應(yīng)用組織塊分離培養(yǎng)法構(gòu)建了3種核型家豬的成纖維細(xì)胞系，冷凍保存細(xì)胞60支。試驗(yàn)對(duì)所分離的成纖維細(xì)胞進(jìn)行了形態(tài)觀察、生長動(dòng)力學(xué)、染色體核型分析、綠色熒光蛋白報(bào)告質(zhì)粒轉(zhuǎn)染以及微生物污染檢測(cè)等方面的生物學(xué)特性研究。
　　結(jié)果表明：倒置相差顯微鏡下3種核型家豬細(xì)胞形態(tài)呈梭形且長勢(shì)良好，為標(biāo)準(zhǔn)成纖

2、維細(xì)胞形態(tài)。凍存細(xì)胞復(fù)蘇之后活力分別為94.0％(雜合子豬)、93.3%(純合子豬)、92.8%(正常核型家豬)，說明間歇降溫凍存法效果良好。免疫組化結(jié)果表明細(xì)胞內(nèi)波形蛋白呈現(xiàn)陽性表達(dá)。細(xì)胞生長曲線呈“S”型，細(xì)胞經(jīng)歷了生長緩慢期，生長對(duì)數(shù)期以及生長平臺(tái)期三個(gè)階段。細(xì)胞核型分析顯示雜合子豬細(xì)胞染色體2n=37所占比例為92.5%，純合子豬細(xì)胞染色體2n=36所占比例為93.8%，正常核型家豬細(xì)胞染色體2n=38所占比例為96.3%。質(zhì)粒