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文檔簡介
1、研究背景:腫瘤血管生成與腫瘤生長、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。抗血管生成治療成為多種實體腫瘤治療中的有效方案。富勒醇C60(OH)22是一種低細(xì)胞毒性納米材料,體內(nèi)研究顯示其具有抗腫瘤作用,機(jī)制包括免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤血管生成等,但它抗血管生成的作用機(jī)制尚不明確。既往研究顯示C60衍生物可以調(diào)控HDAC,而HDAC抑制劑通過下調(diào)HIF-1α、VEGF的表達(dá)從而抑制腫瘤血管生成。本課題進(jìn)一步研究C60(OH)22是否通過調(diào)控HDAC而影響血管生成。
2、 方法:通過檢測細(xì)胞活性(MTT法)來反映C60(OH)22對永生化人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖的影響。通過細(xì)胞侵襲實驗(Transwell法)和網(wǎng)格形成實驗來檢測C60(OH)22對體外HUVEC血管生成的影響。通過檢測C60(OH)22處理后細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)以及HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF、RECK的表達(dá)和MMP2、MMP9酶活性的變化,并進(jìn)一步通過干擾HDAC1或HDAC2的表達(dá)后檢測體外HUV
3、EC介導(dǎo)的血管生成、細(xì)胞內(nèi)ROS以及HIF-1α、VEGF、、RECK表達(dá)和MMP2、MMP9酶活性的變化,來研究C60(OH)22對血管生成的作用機(jī)制。通過裸鼠的Matrigel plug模型,進(jìn)一步研究C60(OH)22對體內(nèi)血管生成及對HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF、MMP2、MMP9、RECK表達(dá)水平的影響。
結(jié)果:C60(OH)22能夠抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移和網(wǎng)格形成,但不影響細(xì)胞活性。C60(OH
4、)22能夠降低細(xì)胞內(nèi)ROS以及HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF的表達(dá),并抑制MMP2、MMP9酶活性,但增加了RECK的表達(dá)。siRNA干擾HDAC1或HDAC2的表達(dá),抑制了血管內(nèi)皮細(xì)胞侵襲和網(wǎng)格形成,降低了細(xì)胞內(nèi)ROS水平以及HIF-1α、VEGF的表達(dá),并抑制了MMP2、MMP9酶活性,但增加了RECK的表達(dá)。體內(nèi)實驗顯示C60(OH)22處理后Matrigel plug中血管數(shù)明顯減少,HDAC1、HDAC2、HI
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