雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物成分及新型循環(huán)色譜的研究.pdf

1、天山雪蓮是一種瀕臨滅絕的名貴中藥，資源極為稀缺。運用細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)可以在短期內(nèi)獲到大量的雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物，理論上可生成與植物雪蓮相同的藥效物質(zhì)，從而成為天然雪蓮的替代資源。本文旨在明確天山雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物中化學(xué)成分，為這種新資源的質(zhì)量控制及進一步開發(fā)奠定基礎(chǔ)。此外，本文還開發(fā)了新制備型循環(huán)液相色譜系統(tǒng)（下文稱“自制色譜系統(tǒng)”），用于解決雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物中低含量成分難分離的問題。
　　本文第一部分（第一章）綜述了藥用雪蓮植物以及天山雪蓮

2、細(xì)胞培養(yǎng)物中化學(xué)成分的研究進展，這其中包括簡單苯丙素類、香豆素類、木脂素類、生物堿類、萜類、黃酮類、甾體類等多種化合物，為天山雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物化學(xué)成分的系統(tǒng)研究提供參考。同時，綜述了色譜儀器的在線前樣品處理技術(shù)和循環(huán)色譜儀器的研究進展，為新色譜系統(tǒng)的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　本文第二部分（第二章）對天山雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)的研究，分離鑒定了酚酸、黃酮、木脂素等類型化合物共計41個，研究結(jié)果表明咖啡酰奎尼酸類化合物是該細(xì)胞培養(yǎng)

3、物中最為豐富的物質(zhì)。其中，蘋果酰-咖啡酰-奎尼酸類化合物為新物質(zhì)，目前在天然植物尚屬罕見，因此在分子結(jié)構(gòu)上具有特征性。體外自由基清除實驗結(jié)果表明，這些新物質(zhì)具有高抗氧化活性?；谝陨涎芯浚疚尼槍ρ┥徏?xì)胞培養(yǎng)物中5個代表性物質(zhì)（即綠原酸、紫丁香苷、1，5-O-二咖啡酰奎尼酸，兩種蘋果酰-咖啡酰-奎尼酸類新化合物），建立了定量分析方法，為該細(xì)胞培養(yǎng)物的質(zhì)量控制，以及培養(yǎng)工藝的調(diào)控提供了參考。
　　本文第三部分（第三～四章）設(shè)計了新制

4、備型循環(huán)液相色譜系統(tǒng)用于雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物中低含量成分的分離。與傳統(tǒng)儀器相比，該色譜系統(tǒng)的主要特點是添加了捕集柱系統(tǒng)，具有在線樣品富集、色譜峰捕集、低含量成分富集、循環(huán)分離、產(chǎn)品濃縮回收等多種實用性功能，可以以簡捷高效的循環(huán)分離方法從復(fù)雜樣品中制備出低含量化合物。本文應(yīng)用自制色譜系統(tǒng)，建立了雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)物中3個蘋果酰-咖啡酰-奎尼酸類新物質(zhì)的循環(huán)分離方法，并以多酚類化合物為模型樣品研究了該循環(huán)分離方法適用的物質(zhì)極性范圍，實驗結(jié)果表明中等極性