腺病毒介導骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉染促進人間充質(zhì)干細胞成骨化的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：觀察腺病毒介導的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP-2)基因轉染對人間充質(zhì)干細胞(hMSCs)成骨能力的影響。
　　 方法：從健康志愿者全骨髓中分離培養(yǎng)hMSCs，體外擴增純化后隨機分為4組。①Ad-BMP-2組：培養(yǎng)液中加入BMP-2基因重組腺病毒(Ad-BMP-2，1×1010OPU/ml)孵育24h，之后換普通培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。②Ad-LacZ組：用半乳糖酐酶基因重組腺病毒(Ad-LacZ)替換Ad-BMP-2，其余處理與Ad-

2、BMP-2組相同。③陽性對照組：培養(yǎng)液中添加地塞米松、抗壞血酸和β-甘油磷酸鈉。④空白對照組：不給予特殊處理。各組細胞處理后2w，Von Kossa 染色檢測hMSCs中骨膠原結節(jié)形成；全自動生化分析儀檢測培養(yǎng)上清堿性磷酸酶(ALP)活性。
　　 結果：經(jīng)多次換液傳代，hMSCs 呈均一梭形形態(tài)。處理后Ad-BMP-2組與陽性對照組細胞形態(tài)逐漸趨于扁平，突起減少。Ad-LacZ組和空白對照組形態(tài)無明顯變化。Von Kossa染色

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