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1、目的:隨著ATRA或As2O3臨床誘導(dǎo)分化治療病例的不斷擴(kuò)大,逐漸發(fā)現(xiàn)該兩種藥物體內(nèi)均可以引起白細(xì)胞明顯升高。本研究主要對(duì)維甲酸和As2O3進(jìn)行了體內(nèi)和體外比較性研究,預(yù)期進(jìn)一步揭示上述現(xiàn)象的分子機(jī)制。方法:ELISA法測(cè)定血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8、G-CSF、sICAM-1和sVCAM-1水平變化,流式細(xì)胞儀測(cè)定APL細(xì)胞表面粘附分子sICAM1,CD11b和CD106表達(dá)水平,Westernblot測(cè)定
2、STAT1和STAT3蛋白表達(dá)水平,半固體瓊脂法測(cè)定APL患者L-CFU和GM-CFU集落數(shù)。結(jié)果:1、維甲酸一般在7~10天內(nèi)誘導(dǎo)明顯的外周血白細(xì)胞升高,平均第12天達(dá)到高峰。2、三氧化二砷除了誘導(dǎo)APL平均第15天達(dá)到高峰外,其它變化與ATRA相似。3、在細(xì)胞因子與細(xì)胞增殖方面,證實(shí)血清IL-1、IL-6、IL-8、G-CSF等發(fā)生變化,血清G-CSF與外周血的白細(xì)胞數(shù)量變化呈相關(guān)性,但是此因素不是決定細(xì)胞變化的唯一因素。4、體外1
3、0-6mol/L或體內(nèi)以10mg/天靜脈滴注三氧化二砷治療96h后,APL細(xì)胞分泌IL-1β和G-CSF平均水平升高,IL-6和IL-8水平降低,TNFα水平無(wú)明顯變化。體外APL細(xì)胞的增殖比率與IL-1β或G-CSF分泌升高比率呈現(xiàn)正相關(guān)。5、APL患者的血清sICAM-1和sVCAM-1水平明顯升高。APL細(xì)胞表面粘附分子sICAM1,CD11b和CD106表達(dá)增加。6、無(wú)論IL-1β抑或是G-CSF升高患者,原代APL細(xì)胞STAT
4、1蛋白表達(dá)均增加,而只有G-CSF升高者STAT3蛋白表達(dá)升高。證實(shí)內(nèi)原性G-CSF明顯促進(jìn)STAT3表達(dá),并經(jīng)過(guò)STAT3發(fā)揮其增殖分化調(diào)控作用。9、ATRA或As2O3治療后,骨髓L-CFU則隨著誘導(dǎo)分化治療呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(shì)。而GM-CFU在白細(xì)胞升高期時(shí)增加不明顯,完全緩解后明顯升高。但是,與患者血清共同培養(yǎng)后,高峰期血清明顯促進(jìn)L-CFU生成作用。結(jié)論:IL-1β或G-CSF分泌增加與ATRA或三氧化二砷誘導(dǎo)后的APL細(xì)胞升高有
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