膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大鼠血清腫瘤壞死因子和肝臟枯否細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響.pdf

1、[背景與目的]梗阻性黃疸(OJ)病人術(shù)后并發(fā)癥及死亡率較高，常并發(fā)感染并死于敗血癥，提示OJ患者免疫功能減退。作為機(jī)體重要防御體系--網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)主要成員的枯否細(xì)胞(Kupffer cell)，成為了國(guó)內(nèi)外學(xué)者們關(guān)注的焦點(diǎn)。之前研究發(fā)現(xiàn)，梗阻性黃疸大鼠肝臟枯否細(xì)胞在內(nèi)毒素刺激下產(chǎn)生大量具有細(xì)胞毒性的一氧化氮，膽汁內(nèi)引流方法可以逆轉(zhuǎn)這種改變，而外引流方法則無(wú)此作用。膽汁引流方法影響枯否細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮的機(jī)理尚不清楚。由此提出假設(shè)，膽汁引流

2、方法對(duì)枯否細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮的影響，是基于其對(duì)枯否細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的作用，并影響腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的產(chǎn)生。本研究通過(guò)討論膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大鼠枯否細(xì)胞iNOS表達(dá)及血清TNF-α的影響，探索膽汁引流方法影響枯否細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮的機(jī)制，從而探討膽汁內(nèi)引流術(shù)優(yōu)于外引流術(shù)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。 [方法]采用成年雄性Sprague -Dawley大鼠48只，隨機(jī)分成梗阻性黃疸(OJ)、膽汁內(nèi)引流(ID)、

3、外引流(ED)和假手術(shù)(SH)4組，每組12只，通過(guò)第一次開腹手術(shù)結(jié)扎并切斷膽總管建立OJ模型，術(shù)后7天第二次手術(shù)，從膨大的膽管末端插入并固定引流管，經(jīng)皮下固定于大鼠頸背部皮膚建立ED模型；ID模型通過(guò)在膨大的膽管末端和十二指腸間植入支架形成。假手術(shù)組模型通過(guò)兩次開腹分離但不結(jié)扎膽總管方法建立。各組均于二次術(shù)后7天處死大鼠，留取標(biāo)本。采用Ⅳ型膠原酶原位灌注方法消化肝臟，經(jīng)Percoll密度梯度離心，分離出肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，貼壁法進(jìn)一步分離