一種新型腫瘤藥敏試驗方法的建立及初步應(yīng)用研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文一種新型腫瘤藥敏試驗方法的建立及初步應(yīng)用研究姓名：于冬冬申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：龔建平2011-04華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文2因為化療方案的選擇是基于人體各種細胞群體對化療藥物的敏感性不同。人體內(nèi)不同組織來源的細胞增殖能力是不同的， 腫瘤組織通常較人體其它組織增殖力旺盛， 此外，腫瘤組織內(nèi)部不同細胞亞群之間也存在著

2、增殖能力的巨大差異，一系列研究認為，化療殺傷的主要是腫瘤組織中這一部分增殖活躍的細胞群體。因此，從這一點出發(fā)，首先，我們在檢測化療藥物對原代腫瘤細胞的殺傷能力的同時，也對這群細胞的增殖能力加以檢測， 以Ki-67為標志檢測細胞增殖比例。 原代腫瘤細胞在體外加入化療藥物共同培養(yǎng)后，以Annexin-V和PI聯(lián)合標記來檢測細胞凋亡率。以增殖群體被藥物殺傷后發(fā)生凋亡的比例來衡量藥物的療效。大量病例數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析表明，整體上，細胞凋亡率和細胞增殖

3、率波動在近似范圍，這種現(xiàn)象也反映了化療的實質(zhì)。因此，我們提出將增殖和凋亡相結(jié)合來衡量腫瘤化療敏感性的新理念，并初步建立了一種新型體外腫瘤藥敏試驗方法，即藥物敏感性=細胞凋亡率/增殖細胞比例×100%。進而，為了驗證我們新建立的腫瘤藥敏試驗方法的靈敏度和特異性，我們首先用原代胃腸道腫瘤細胞建立了裸鼠移植瘤模型，運用不同化療方案治療后，治療效果與同一腫瘤原代細胞體外藥敏試驗的結(jié)論進行比較， 結(jié)果證實我們新提出的腫瘤藥敏實驗方法靈敏

4、度和特異性均高于傳統(tǒng)的MTT腫瘤藥敏試驗， 說明新方法能夠有效預(yù)測腫瘤的藥物敏感性。 然后，我們選取了一部分胃腸道腫瘤病例，術(shù)后取腫瘤組織依據(jù)新型腫瘤藥敏試驗方法進行藥物敏感性檢測，且入選患者術(shù)后都進行了FOLFOX方案的化療，并密切跟蹤隨訪。結(jié)果表明，經(jīng)新型腫瘤藥敏試驗檢測顯示腫瘤對FOLFOX方案有效的患者群體，其預(yù)后明顯優(yōu)于檢測顯示腫瘤對FOLFOX方案耐藥的患者群體，這表明，我們建立的新型腫瘤藥敏試驗方法可以反映腫瘤的化療敏感性