抗體催化的臭氧生成及其在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病中的潛在作用.pdf

1、最近的研究發(fā)現(xiàn)了抗體一種新的特性，表明抗體在免疫系統(tǒng)中具有一種前所未知的效應(yīng)功能，即所有的免疫球蛋白，不論其來(lái)源或其抗原特異性，都能催化單線態(tài)氧(<'1>0<,2>)和水反應(yīng)生成過(guò)氧化氫(H<,2>0<,2>)和臭氧(0<,3>)，從而對(duì)外來(lái)抗原產(chǎn)生直接的殺傷作用。該項(xiàng)功能的發(fā)現(xiàn)無(wú)疑極大地豐富了對(duì)抗體殺滅病原微生物能力的認(rèn)識(shí)，但同時(shí)也提示了該催化效應(yīng)潛在的病理生理學(xué)意義。因?yàn)?<,3>是一種高度反應(yīng)性的氣體分子，H<,2>0<,2>也是

2、一種強(qiáng)氧化劑，它們既可殺滅病原微生物，亦能造成組織的氧化性損傷。 鑒于動(dòng)脈粥樣硬化癥是一種與脂質(zhì)氧化損傷有關(guān)的慢性炎癥性疾病，我們推測(cè)抗體的這種催化水的氧化作用是否與AS的發(fā)病過(guò)程產(chǎn)生某種內(nèi)在的聯(lián)系。因此本文觀察了激活的THP-1單核細(xì)胞在抗體的催化下生成的產(chǎn)物，進(jìn)一步探討了抗體催化水的氧化過(guò)程產(chǎn)生的H202和03對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變產(chǎn)生的潛在作用。 本研究采用靛藍(lán)胭脂紅褪色反應(yīng)檢測(cè)激活的THP-1單核細(xì)胞產(chǎn)生的0<,

3、3>；采用熒光分光光度法分別檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)各種膽固醇的含量和細(xì)胞產(chǎn)生的過(guò)氧化氫H<,2>0<,2>；采用硫代巴比妥酸(TBA)法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的含量；采用油紅O染色法檢測(cè)泡沫細(xì)胞的形成；采用高效液相色譜法(HPLC)分析細(xì)胞內(nèi)膽固醇的臭氧氧化產(chǎn)物5,6-secosterol的生成。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，THP-1單核細(xì)胞經(jīng)人IgG、佛波酯(PMA)共同孵育。后，顯著產(chǎn)生H<,2>O<,2>，并產(chǎn)生了O<,3>的化學(xué)信號(hào)，對(duì)靛藍(lán)胭

4、脂紅具有明顯的褪色作用。過(guò)氧化氫酶能加強(qiáng)這種褪色反應(yīng)，而乙烯苯甲酸則具有抑制作用；THP-1單核細(xì)胞經(jīng)人IgG、PMA及低密度脂蛋白(LDL)共同孵育后，其細(xì)胞內(nèi)積聚的總膽固醇(TC)、游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物均明顯增多，并顯著產(chǎn)生了膽固醇的臭氧氧化產(chǎn)物5,6-seeosterol，油紅O染色也發(fā)現(xiàn)大量泡沫細(xì)胞的形成，乙烯苯甲酸對(duì)它們均具有顯著的抑制作用，過(guò)氧化氫酶則幾乎不產(chǎn)生影響效應(yīng)。 結(jié)論：我們的

5、研究顯示，激活的THP-1單核細(xì)胞在抗體的誘導(dǎo)下產(chǎn)生了H<,2>O<,2>和O<,3>。乙烯苯甲酸作為一種特異的臭氧捕獲劑，能對(duì)由抗體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)膽固醇及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的積聚、泡沫細(xì)胞的形成產(chǎn)生顯著的抑制作用。相反，過(guò)氧化氫酶雖然能分解H<,2>O<,2>，卻對(duì)這些參數(shù)幾乎不產(chǎn)生影響。因此我們推測(cè)抗體催化水的氧化作用生成的O<,3>，而非H<,2>O<,2>，可能是促使細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的氧化、聚積及泡沫細(xì)胞形成的一種重要機(jī)制。而且我們也發(fā)現(xiàn)在