流體切應(yīng)力對(duì)老年和年經(jīng)大鼠腸系膜微動(dòng)脈Akt和FoxO表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察流體切應(yīng)力對(duì)年輕和老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈Akt和FoxO表達(dá)的影響,分析探討它們?cè)谘芾匣械淖饔谩?br>　　 方法:(1)采用選擇性結(jié)扎年輕(6月齡)和老年(24月齡)大鼠腸系膜微動(dòng)脈產(chǎn)生不同的流體切應(yīng)力制備高和正常流體切應(yīng)力微動(dòng)脈灌流模型,術(shù)后三周分離血管用于實(shí)驗(yàn);(2)用微血管灌流系統(tǒng)測(cè)定不同壓力下血管內(nèi)、外徑并計(jì)算管壁厚度和血管壁彈性的變化;(3)用HE染色方法觀察腸系膜微動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化;(4)Western Blo

2、tting法檢測(cè)腸系膜微動(dòng)脈Akt,p-Akt,FoxO3a,p-FoxO3a,FoxO1,p-FoxO1蛋白的表達(dá)水平;(5)RT-PCR法檢測(cè)腸系膜微動(dòng)脈Akt,FoxO3a,FoxO1 mRNA的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:(1)體外微動(dòng)脈灌流和形態(tài)學(xué)觀察顯示,與年輕大鼠相比,老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈膠原纖維成分增加,管壁增厚,管腔擴(kuò)張,血管彈性減弱。增加血管內(nèi)流體切應(yīng)力后,其彈性增加(P＜0.05),血管未見(jiàn)明顯形態(tài)學(xué)改變;(2

3、)WesternBlotting檢測(cè)結(jié)果顯示,年輕和老年大鼠NF及HF。腸系膜微動(dòng)脈Akt總蛋白表達(dá)水平無(wú)明顯不同(P＞0.05);增加血管內(nèi)的流體切應(yīng)力,可同時(shí)增加年輕和老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈p-Akt蛋白的表達(dá)水平(P＜0.05),以年輕大鼠增加明顯;老年大鼠NF腸系膜微動(dòng)脈FoxO3a和p-FoxO3a以及FoxO1和p-FoxO1蛋白的表達(dá)水平均低于年輕大鼠(P＜0.05);增加流體切應(yīng)力可以同時(shí)增加年輕和老年大鼠微動(dòng)脈FoxO3

4、a和p-FoxO3a以及FoxO1和p-FoxO1蛋白的表達(dá)水平(P＜0.05),以p-FoxO3a,和p-FoxO1蛋白表達(dá)增加明顯(P＜0.05);老年HF微動(dòng)脈FoxO3a和FoxO1蛋白表達(dá)水平接近年輕大鼠NF微動(dòng)脈的表達(dá)水平(P＞0.05);老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈p-FoxO3a的表達(dá)水平較年輕大鼠高(P＜0.05),而p-FoxO1蛋白表達(dá)水平與年輕大鼠無(wú)明顯不同(P＞0.05);(3)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,年輕和老年大鼠

5、NF和HF腸系膜微動(dòng)脈Akt mRNA的表達(dá)無(wú)明顯不同(P＞0.05);老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈FoxO3a、FoxO1 mRNA的表達(dá)低于年輕大鼠(P＜0.05),增加流體切應(yīng)力后,老年和年輕大鼠微動(dòng)脈FoxO3a和FoxO1 mRNA的表達(dá)均增多(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:(1)年輕和老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈Akt在基因和總蛋白水平的表達(dá)沒(méi)有顯著性差異;增加流體切應(yīng)力可以激活年輕和老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈的Akt蛋白,對(duì)年輕大鼠微動(dòng)

6、脈Akt的激活作用更明顯;(2)老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈FoxO3a在基因和蛋白水平的表達(dá)均比年輕大鼠低;增加流體切應(yīng)力可以同時(shí)增加年輕和老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈FoxO3a的表達(dá),使老年大鼠高灌流微動(dòng)脈FoxO3a的表達(dá)水平接近年輕大鼠正常灌流微動(dòng)脈,失活的FoxO3a蛋白表達(dá)水平較高;(3)老年大鼠腸系膜微動(dòng)脈FoxO1在基因和蛋白水平的表達(dá)均比年輕大鼠低;增加流體切應(yīng)力可以同時(shí)增加老年和年輕大鼠FoxO1 mRNA和蛋白的表達(dá),老年大鼠高