失血性休克大鼠腸上皮細胞線粒體DNA COX基因、表達和功能改變及Rg1干預的研究.pdf

1、一、研究失血性休克大鼠缺血氧后腸上皮細胞線粒體DNA COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ基因損傷(突變)及其表達改變和突變后對其編碼的COX酶蛋白質空間結構的改變及其對酶功能的影響,從基因、轉錄、翻譯水平探討缺血缺氧后COX在線粒體有氧呼吸功能改變中的作用,闡明其結構和功能的關系,揭示細胞缺血缺氧性損害中能量代謝障礙的分子機制.二、研究三七皂甙單體Rg1對失血性休克大鼠缺血氧后腸上皮細胞線粒體損傷的保護作用及其對COX活性和相關基因表達的影響

2、,從線粒體的形態(tài)、功能、基因表達及失血性林克大鼠存活率等多方面探討Rg1對缺血缺氧性線粒體損傷的保護作用及其機理.失血性休克晚期可導致大鼠腸上皮細胞mtDNA編碼的COXⅠ、COXⅡ亞基基因突變,同時伴有該酶活性的明顯下降,采用生物信息學技術,通過計算機模建的大鼠腸上皮細胞mtDNA突變后COX的三維結構分析表明COX基因的突變導致了整個酶復合物的三維空間結構改變.提示:突變后酶復合物的結構改變是酶活性降低的重要原因.RT-PCR和We

3、stern blot檢測結果顯示,失血性休克晚期可導致大鼠腸上皮細胞編碼COXⅠ、COXⅡ基因表達下降,線粒體蛋白表達量減少,呼吸功能降低.提示:線粒體功能障礙與線粒體編碼COXⅠ、COXⅡ基因之間存在聯系.失血性休克晚期可導致大鼠腸上皮細胞線粒體出現一定程度膜損傷、體積增大等形態(tài)變化,這種變化可能與失血性休克時mtDNA損傷、轉錄、翻譯功能的改變、呼吸功能下降及酶的結構和活性改變有關,提示:mtDNA編碼COX基因損傷及其表達的改變可