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1、遼寧中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文肺積寧方誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡及下調(diào)VEGF表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究姓名:張巍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師:殷東風(fēng)20080530FeiJiNingDecotioninducedapoptosiS’anddownregulation●r、,、n’1o111’eXDreSSlOnofV匕bp1nhUmanlungaOenocarclnomace上上上1neA549:anexperimentalstu
2、dyZhangWeiYinDong—fengDepartmentofInternalOncology,Affi1iatedHospitalofLiaoningUniversityoftraditionalChinesemedicineAbstractObject:ToexploretheeffectofFeiJiNingDecotion(FJN)extractSonproliferation、apoptosiSandexpression
3、ofVascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inhumanlungadenocarcinomacell1ineA549Method:CultureA549cellinvitro,theproliferateinhibitratewasevaluatedbyMTTassay,ApoptotiCratewasdeterminedPI/AnnexinV—FITCdoublestaining,themorpho
4、logicalchangeofapoptoticcellwasobservedbyfluorescencemicroscopeandthegrowthstateofcellwasobservedbyinvertedmicroscopetheexpressionofVEGFwasdetectedbyELISAResults:MTTassayshowedthatvariousdoseteamscaninhibithumanlungadeno
5、carcinomaA549proliferationinadosedependentmannerTheIC50iS200mg/ml,weselectedfourdifferentConcentra—tion(30mg/ml,l00mg/ml,200mg/ml,1lOOmg/m1)aSexperimentalconcentration,andexperimentaltimeiS72hMorphologicalstudyshowedthat
6、,withthedoseofincreasing,thecelladhesionabilitydecreased,manycellsshedfromtheculturebottlewallandfloatinginculturemediumTheconfigurationchangestheCircle,thevolumereduces,thecel1spacingincreases,andlightrefr鹋tionisstronge
7、rAnnexinV/PIdoublestaining,ThecellapoptosiSwasevaluatedbyflowcytometryitshowsthatFJNdecotioncandeducecellapoptosiS,whichincreasewithraisedconcentrationAfterthechisquaretest,thecellapoptosiSoffourdoseteamiShigherthancontr
8、olgroup,thedifferenceiSremarkable(PO05):thehighdoseteam(1100mg/m1)iShigherthancontrolgroup(43%)obviously,pO01AnnexinV/PIdoublestaining,atypicalsetofchangessuchascellshrinkage,cleavageofnucIear,chromatincondensation,membr
9、aneblendingandapoptoticbodyformationwillbeobservedinfluorescencemicrosxopeA11doseteamcandownregulationVEGFexpression,andthedegreesoftheirdeclineswereinadose—dependentfashionwhentheConcentrationiS200mg/mlandllOOmg/ml,thdi
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