BmNPV侵染狀態(tài)下及蛻皮前后家蠶幼蟲血淋巴的蛋白質(zhì)組學(xué)分析.pdf

1、家蠶是鱗翅目昆蟲的代表，在昆蟲的生理、發(fā)育、遺傳和內(nèi)分泌等研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，而且蠶桑業(yè)在許多國家的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中也占有重要地位。家蠶核型多角體病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus，BmNPV)是血液型膿病的病原，該病毒的擴(kuò)散能給養(yǎng)蠶業(yè)造成巨大的損失。蛻皮是家蠶生長中必須要經(jīng)歷的過程，家蠶必須脫去舊表皮，才能進(jìn)行正常的生長。所以對(duì)家蠶與BmNPV之間相互作用的研究及對(duì)家蠶蛻皮機(jī)制的研究對(duì)深入

2、理解BmNPV的感染途徑、家蠶對(duì)BmNPV的免疫機(jī)制和家蠶的發(fā)育等方面具有重要意義。家蠶基因組序列已經(jīng)完成，但mRNA和蛋白質(zhì)之間并不呈嚴(yán)格的線性關(guān)系，蛋白質(zhì)才是生命活動(dòng)的執(zhí)行者，所以在蛋白質(zhì)水平對(duì)家蠶的生命活動(dòng)進(jìn)行研究是必需的。蛋白質(zhì)組學(xué)是對(duì)細(xì)胞、組織或器官中所有的蛋白質(zhì)進(jìn)行研究的科學(xué)，自該技術(shù)應(yīng)用到生命科學(xué)以來就顯示了強(qiáng)大的發(fā)展前景。本試驗(yàn)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)家蠶幼蟲受到BmNPV侵染后及蛻皮前后的血淋巴蛋白質(zhì)變化進(jìn)行了研究，結(jié)果如下

3、： 一、BmNPV侵染狀態(tài)下家蠶幼蟲血淋巴的蛋白質(zhì)組學(xué)分析 為更深的理解家蠶與BmNPV之間的相互關(guān)系，用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)注射BmNPV后不同時(shí)間家蠶幼蟲的血淋巴中蛋白質(zhì)變化進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，注射BmNPV后，隨著時(shí)間的延長，家蠶幼蟲血淋巴中的蛋白質(zhì)種類呈明顯降低趨勢；在注射BmNPV后的第12h和24h時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組相比，共有16個(gè)蛋白點(diǎn)發(fā)生了上調(diào)或下調(diào)，對(duì)這16個(gè)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，其中13個(gè)具有可信結(jié)果(共11種

4、蛋白質(zhì))。結(jié)果暗示這11種蛋白質(zhì)、在數(shù)據(jù)庫中沒有可信匹配結(jié)果的3種蛋白質(zhì)以及受BmNPV關(guān)閉的基因可能與BmNPV和家蠶幼蟲的相互作用或與家蠶幼蟲對(duì)BmNPV的免疫過程有關(guān)。 二、蛻皮前后家蠶幼蟲血淋巴的蛋白質(zhì)組學(xué)分析 通過對(duì)家蠶幼蟲血淋巴在蛻皮前后的蛋白質(zhì)變化進(jìn)行研究，可以發(fā)現(xiàn)與蛻皮過程有關(guān)的蛋白質(zhì)，為深入研究家蠶幼蟲的蛻皮過程提供新的思路，也為研究其它昆蟲的蛻皮過程提供啟示。應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)家蠶幼蟲血淋巴在蛻皮前

5、后的蛋白質(zhì)變化進(jìn)行研究。結(jié)果顯示：經(jīng)過蛻皮過程后，家蠶幼蟲血淋巴中蛋白質(zhì)的數(shù)量、種類和部分蛋白質(zhì)的表達(dá)量發(fā)生了明顯的變化：4眠蠶血淋巴中有10個(gè)明顯的特異蛋白點(diǎn)，5齡起蠶血淋巴中2個(gè)明顯的特異蛋白點(diǎn)，還有2個(gè)蛋白點(diǎn)的表達(dá)量發(fā)生了明顯的上調(diào)或下調(diào)。經(jīng)過質(zhì)譜鑒定，以上14個(gè)蛋白點(diǎn)中有9個(gè)具有可信結(jié)果。結(jié)果暗示化學(xué)感應(yīng)蛋白9、儲(chǔ)存蛋白2、抗胰蛋白酶原、酚氧化酶原亞基1和親環(huán)蛋白A、KIF27類蛋白、天蠶素原、副肌球蛋白、神經(jīng)原鈣結(jié)合蛋白以及另