膀胱尿路上皮細(xì)胞癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其臨床意義.pdf

1、目的 運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)分析D9S54、D9S162、D9S747、IFN-A1四個微衛(wèi)星位點(diǎn)在膀胱尿路上皮細(xì)胞癌(UCC)腫瘤組織和尿沉渣腫瘤細(xì)胞中的變化，探討這四個高頻位點(diǎn)的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI)與膀胱UCC生物學(xué)行為的關(guān)系，并與目前常用的尿細(xì)胞學(xué)檢查相比較，探討膀胱UCC早期診斷和監(jiān)測復(fù)發(fā)的簡單有效方法。 方法 收集44例初發(fā)UCC患者腫瘤組織和10例無腫瘤的膀胱組織及對應(yīng)患者的外周靜脈血、尿液標(biāo)本，UC

2、C患者經(jīng)病理科HE染色切片明確診斷，依據(jù)CT結(jié)合膀胱鏡檢查對腫瘤進(jìn)行TNM分期，依據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)判定病理分級。Ta-T1期24例，T2期以上20例；G1-G2級20例，G3級24例。隨訪3～16個月，隨訪期間14例復(fù)發(fā)患者再次取尿沉渣和外周血標(biāo)本。對以上標(biāo)本進(jìn)行MSI檢測。采用經(jīng)典的酚-氯仿抽提法提取樣本DNA，在15μL反應(yīng)體系中進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物以1.8％瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳。以外周血淋巴細(xì)胞DNA的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物作為參照，腫瘤組

3、織及尿沉渣標(biāo)本的擴(kuò)增產(chǎn)物在相鄰條帶上于同一條件下進(jìn)行電泳，等位基因電泳條帶的位置改變或出現(xiàn)額外條帶即判定為微衛(wèi)星不穩(wěn)定。2個或2個以上位點(diǎn)出現(xiàn)MSI判定為MSI-H，一個位點(diǎn)出現(xiàn)MSI判定為MSI-L，無MSI記為MSS。同時對44例初發(fā)患者進(jìn)行尿細(xì)胞學(xué)檢查，采用巴氏分級，三級以上為陽性。采用stata7.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行x<'2>檢驗，比較各組MSI或尿細(xì)胞學(xué)檢出率之間的差異。 結(jié)果 44例膀胱UCC至少發(fā)生一個微衛(wèi)星位點(diǎn)改變

4、即MSI的檢出率為77.3％(34／44)，10例無腫瘤膀胱組織未檢出MSI，兩者比較P<0.001；高分級腫瘤MSI-H的檢出率明顯高于低分級腫瘤(P<0.001)；不同分期的腫瘤組織MSI檢出率無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.077)；尿沉渣MSI檢測陽性率為77.3％(34／44)，尿細(xì)胞學(xué)陽性率為40.1％(18／44)，兩者比較，MSI檢測陽性率明顯高于尿細(xì)胞學(xué)檢查(P<0.001)24例表淺膀胱UCC(Ta～T1期)患者，尿沉渣MSI