烯丙基羥化酶產(chǎn)生菌的篩選及其生物轉(zhuǎn)化制備1α-羥基維生素D的研究.pdf

1、活性維生素D類藥物適用于防治骨質(zhì)疏松癥、甲狀旁腺功能亢進(jìn)以及減退、營養(yǎng)和吸收障礙引起的佝僂病和骨軟化癥、假性缺鈣的佝僂病和骨軟化癥等。其本身是人體肝和腎的代謝產(chǎn)物,但是從生物組織中提取這些物質(zhì)的工作量巨大,收率極低,顯然無法滿足臨床的需求。
　　 化學(xué)合成方法來制造則需進(jìn)行多步的基團保護(hù)和脫保護(hù),運用光照反應(yīng),開環(huán)和異構(gòu)化,合成步驟繁多,分離純化復(fù)雜,合成收率很低。
　　 本文采用生物轉(zhuǎn)化法制備活性維生素D,為生物制備活

2、性維生素奠定了基礎(chǔ)。生物轉(zhuǎn)化能夠進(jìn)行某些化學(xué)方法難于進(jìn)行或不能合成的反應(yīng),產(chǎn)物立體構(gòu)型單一,且轉(zhuǎn)化條件溫和。
　　 首先我們從自然界采集樣品中分離并篩選了烯丙基羥化酶產(chǎn)生菌,得到了四株生長狀況良好,轉(zhuǎn)化能力強的菌種。對其進(jìn)行了菌種鑒定及利用產(chǎn)生菌生物轉(zhuǎn)化制備活性維生素D。
　　 轉(zhuǎn)化過程中對轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的檢測采用薄層色譜法(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)。經(jīng)制備HPLC,收集轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,通過核磁共振氫譜和質(zhì)譜檢測,結(jié)果表