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文檔簡介
1、目的: 良性前列腺增生(BPH)是老年男性常見病,其發(fā)病率占老年男性首位。目前尚無有效的預(yù)防措施,各種治療方法也具有一定的缺陷。BPH一般采用手術(shù)和藥物治療,手術(shù)治療雖然效果較好,但患者接受能力差,藥物治療存在較大的副作用。因此,尋找良好的預(yù)防性藥物意義重大。以往研究顯示,飲食成分與前列腺增生的發(fā)病有關(guān),因此選擇合適的飲食成分作為BPH的預(yù)防性藥物具有一定的可行性。 流行病學(xué)資料表明,西方國家前列腺癌的發(fā)病率明顯高于某些
2、亞洲國家,其中一個(gè)原因就在于東西方膳食結(jié)構(gòu)上有明顯的差異,即在東方國家,豆制品在膳食中占有重要的地位。大豆異黃酮為植物雌激素,其主要成分為三羥異黃酮、二羥異黃酮和6-甲氧基大豆素。它對和激素作用有關(guān)的腫瘤具有抑制作用,其機(jī)制主要為大豆異黃酮具有雌激素和抗雌激素樣作用,抑制5α還原酶、酪氨酸蛋白激酶、細(xì)胞增生和血管生成等功能。姜黃是姜科植物的根莖,屬于活血中藥,姜黃素是其主要成分之一。姜黃素的抗腫瘤作用已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn),其機(jī)制主要為姜黃
3、素具有抗氧化,誘導(dǎo)凋亡與分化,調(diào)控癌基因、抑癌基因,調(diào)控細(xì)胞周期等作用。大豆異黃酮和姜黃素有可能成為預(yù)防良性前列腺增生的食物成份,而國內(nèi)外尚無同時(shí)使用大豆異黃酮和姜黃素抑制良性前列腺增生的相關(guān)的研究。 該研究探討大豆異黃酮和姜黃素單獨(dú)應(yīng)用和聯(lián)合應(yīng)用對前列腺增生的體外、體內(nèi)的抑制作用;并進(jìn)一步揭示大豆異黃酮和姜黃素預(yù)防前列腺增生的作用機(jī)制,為前列腺藥物預(yù)防提供依據(jù)。 方法: 體外實(shí)驗(yàn)中對Wistar大鼠的前列腺平滑
4、肌細(xì)胞應(yīng)用大豆異黃酮和姜黃素,采用MTT比色法探討大豆異黃酮和姜黃素單獨(dú)應(yīng)用或聯(lián)合應(yīng)用對前列腺平滑肌細(xì)胞的體外抑制作用。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中采用睪酮誘導(dǎo)得到前列腺增生小鼠模型,對前列腺增生模型小鼠應(yīng)用大豆異黃酮和姜黃素,探討大豆異黃酮和姜黃素單獨(dú)應(yīng)用或聯(lián)合應(yīng)用對睪酮誘導(dǎo)的小鼠前列腺增生的對抗作用。機(jī)制研究中利用光學(xué)顯微鏡觀察大豆異黃酮和姜黃素對細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變;通過免疫組織化學(xué)法檢測細(xì)胞Bcl-2蛋白含量的改變;利用RT-PCR技術(shù)檢測大豆異
5、黃酮和姜黃素凋亡相關(guān)基因bcl-2和TERT的mRNA表達(dá)量的改變。 結(jié)果: 體外實(shí)驗(yàn)MTT法測得大豆異黃酮和姜黃素均能抑制前列腺平滑肌細(xì)胞增殖,且抑制率隨劑量和作用時(shí)間的增加而逐漸增加。大豆異黃酮單獨(dú)作用24、48、72小時(shí)的半數(shù)抑制率(IC50)分別為131mg/L、73mg/L、50mg/L;姜黃素單獨(dú)作用24、48、72小時(shí)的半數(shù)抑制率(IC50)分別為60μmol/L、41μmol/L、25μmol/L。聯(lián)合應(yīng)
6、用大豆異黃酮和姜黃素時(shí),它們抑制前列腺平滑肌細(xì)胞增生的交互作用為:用藥24小時(shí)q值為1.18,表現(xiàn)為協(xié)同作用;用藥48、72小時(shí)q值分別為1.15、1.01,表現(xiàn)為相加作用。 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,睪酮組的前列腺指數(shù)高于正常對照組(p<0.01),說明成功建立高雄激素誘導(dǎo)的前列腺增生小鼠模型。大豆異黃酮、姜黃素組和聯(lián)合用藥組的小鼠前列腺指數(shù)均低于睪酮組(p<0.05),而與正常對照組差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。大豆異黃酮的抑制率為3
7、1.97%,姜黃素的抑制率為15.74%,兩藥聯(lián)合應(yīng)用時(shí)抑制率為14.21%,大豆異黃酮組的抑制率大于姜黃素組和聯(lián)合用藥組(p<0.05),姜黃素組與聯(lián)合用藥組差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。聯(lián)合應(yīng)用大豆異黃酮和姜黃素時(shí),它們對睪酮誘導(dǎo)的小鼠前列腺增生的抑制作用呈現(xiàn)拮抗作用(q值=0.33)。各組間睪丸重量差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 大豆異黃酮和姜黃素對前列腺增生的抑制作用的機(jī)制研究顯示:大豆異黃酮和姜黃素均使前列腺平
8、滑肌細(xì)胞凋亡,細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察中鏡下可見凋亡小體;免疫組化試驗(yàn)顯示大豆異黃酮和姜黃素均能降低前列腺平涓肌細(xì)胞的bcl-2的表達(dá);RT-PCR結(jié)果顯示大豆異黃酮和姜黃素均能降低前列腺平滑肌細(xì)胞中bcl-2和TERT的mRNA表達(dá)量,且大豆異黃酮降低較姜黃素明顯,兩藥聯(lián)合作用呈現(xiàn)相加作用。 結(jié)論: 大豆異黃酮和姜黃素在體外實(shí)驗(yàn)中可以抑制前列腺平滑肌細(xì)胞增生,并且兩藥聯(lián)合呈現(xiàn)協(xié)同或相加作用,在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可以對抗睪酮誘導(dǎo)的小鼠前列
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