益腎清利、和絡(luò)泄?jié)岱鼓I臟纖維化的機(jī)制與治療2—3期慢性腎臟病的臨床療效評(píng)價(jià).pdf

1、目的：腎臟纖維化是慢性腎臟病發(fā)展為慢性腎衰竭的主要原因，慢性腎臟病在發(fā)展為慢性腎衰竭的過程中有一個(gè)共同的病理學(xué)特點(diǎn)：從纖維化到硬化。腎臟纖維化的病理特征主要表現(xiàn)為細(xì)胞外基質(zhì)積聚，腎小球正常結(jié)構(gòu)消失，腎臟功能逐漸喪失直至廢用。導(dǎo)致這種病理變化并最終出現(xiàn)腎功能下降的因素有以下幾個(gè)方面：蛋白尿、血脂代謝異常、凝血和血液流變學(xué)異常、足細(xì)胞損害、腎臟組織及細(xì)胞因子的表達(dá)和代謝異常。首先，實(shí)驗(yàn)研究以阿霉素腎病大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的蛋白尿

2、、血液生化、血液流變學(xué)、足細(xì)胞標(biāo)志蛋白和腎臟組織及細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)檢測(cè)，探討益腎清利、和絡(luò)泄?jié)岑煼ㄖ委煱⒚顾啬I病大鼠的機(jī)制及療效。臨床研究對(duì)已經(jīng)接受完善降壓、糾酸、調(diào)脂、改善水電平衡等基礎(chǔ)治療的慢性腎臟病2-3期“腎虛濕瘀證”的患者開展臨床研究，以僅接受基礎(chǔ)治療的慢性腎臟病2-3患者作為對(duì)照組，評(píng)價(jià)以“益腎清利、和絡(luò)泄?jié)岱ā睘橹鞯闹嗅t(yī)療法的療效，為進(jìn)一步深入探討中醫(yī)辨證治療在慢性腎臟病臨床治療中的作用尋求依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)研究，參

3、考相關(guān)文獻(xiàn)[1-2]，應(yīng)用阿霉素對(duì)SD大鼠尾靜脈進(jìn)行一次性注射，造成大鼠腎臟產(chǎn)生類似人類慢性腎炎的病理學(xué)改變。按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、陰性對(duì)照組、中藥治療組、西藥治療組、中藥+西藥治療組。動(dòng)態(tài)留取大鼠實(shí)驗(yàn)開始后24小時(shí)小便標(biāo)本，測(cè)定尿蛋白定量和尿N-酰-B-D-葡萄糖酐酶（NAG）酶；不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、甘油三脂（TG）、膽固醇（CHO）水平。造模后第8周末處死大鼠

4、，取出腎臟組織分別處理，然后應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察腎臟組織病理學(xué)形態(tài)變化，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)組織纖維化相關(guān)細(xì)胞因子如纖維連接蛋白（FN）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）和膠原Ⅳ（CoⅣ）的含量，應(yīng)用分子生物學(xué)研究方法以及圖象分析技術(shù)，分析各組大鼠腎臟組織中TIMP-1、TGF-β1、MMP-9和Nephrin的表達(dá)水平。臨床研究，按照美國(guó)NKF-K/DOGI工作組制定的《慢性腎臟病及透析的臨床實(shí)踐指南Ⅱ》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)國(guó)家食品和藥品監(jiān)

5、督管理局制定的《中藥新藥臨床指導(dǎo)原則（慢性腎衰竭）》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)和治療原則，對(duì)多種影響腎臟功能的因素進(jìn)行臨床監(jiān)測(cè)。在控制血壓、糾正水電解質(zhì)紊亂等治療的基礎(chǔ)上，應(yīng)用以益腎清利、和絡(luò)泄?jié)岱樵瓌t辨證論治的中藥方劑，對(duì)2-3期慢性腎臟病患者的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目、中醫(yī)癥候積分動(dòng)態(tài)觀察，對(duì)比不同療法的臨床療效。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)研究，阿霉素腎病大鼠的中藥治療組尿蛋白含量和尿NAG酶與阿霉素腎病大鼠模型組和西藥治療組比較減輕明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還提示中

6、藥配合西藥可以調(diào)節(jié)脂代謝，降低膽固醇水平和改善血液流變學(xué)情況，使血漿粘度下降。腎臟的病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)模型組的腎小球、細(xì)胞外基質(zhì)和腎小管間質(zhì)病變明顯。中藥治療組、西藥治療組和中藥+西藥治療組與模型組比較可見上述改變出現(xiàn)不同程度的減輕。免疫組織化學(xué)中應(yīng)用光密度積分定量檢測(cè)腎臟組織的組織纖維化相關(guān)因子如FN、MMP-9和CoⅣ的含量情況。通過SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析表明，各治療組的表達(dá)量與模型組之間有明顯差別，提示各組治療藥物可以抑制阿霉素腎病

7、大鼠腎臟細(xì)胞外基質(zhì)增生相關(guān)的細(xì)胞因子的過度表達(dá)。我們應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）的方法檢測(cè)各組大鼠腎臟組織的TIMP-1、TGF-β1、MMP-9和Nephrin指標(biāo)的RNA表達(dá)情況。各組治療藥物（不含陰性對(duì)照組）可以減輕阿霉素腎病大鼠纖維化正相關(guān)因子TIMP-1和TGF-β1的表達(dá)。中藥+西藥治療組療效明顯優(yōu)于其他各組，差異有顯著性（P<0.05）。腎臟纖維化負(fù)相關(guān)因子MMP-9和足細(xì)胞相關(guān)蛋白Nephrin的RNA表達(dá)情

8、況提示各組治療藥物（不含陰性對(duì)照組）可以保護(hù)阿霉素腎病大鼠腎臟足細(xì)胞并提高纖維化負(fù)相關(guān)因子MMP-9的表達(dá)量，中藥+西藥治療組療效明顯優(yōu)于其他各治療組，差異有顯著性。 臨床研究病例來源于江蘇省中醫(yī)院和蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院的門診和住院患者，共納入2-3期慢性腎臟病患者90例，其中男性58例，女性32例。收集患者相關(guān)的臨床數(shù)據(jù)資料，應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果提示，以益腎清利、和絡(luò)泄?jié)釣橹委熢瓌t的中藥方劑與西藥基礎(chǔ)

9、治療相配合的中西藥治療組與單純西藥基礎(chǔ)治療組進(jìn)行比較。結(jié)合相關(guān)臨床療效指標(biāo)提示中西藥治療組相比單純西藥治療組，可以降低患者腎臟功能的下降速度，改善患者的癥候，提高患者臨床療效和依從性。 結(jié)論：“益腎清利、和絡(luò)泄?jié)岱ā钡闹兴幏絼?，可以減少阿霉素腎病大鼠的蛋白尿、降低尿液的NAG酶、減輕腎臟組織細(xì)胞外基質(zhì)合成、抑制TIMP、TGF-β1的表達(dá)、提高抗組織纖維化因子MMP-9和足細(xì)胞標(biāo)志蛋白（nephrin）的表達(dá)。中藥方劑和貝那普利