外源性神經(jīng)節(jié)苷脂（GM-,1-）在神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化中的作用.pdf

1、研究目的:①從大鼠的大腦皮層和海馬分離培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs),并觀察它的生長、增殖和分化特點.②探討在GM<,1>的作用下,體外培養(yǎng)的大鼠NSCs的增殖、分化情況.研究方法:①利用無血清培養(yǎng)技術(shù)從胎鼠和乳鼠的大腦皮層和海馬分離培養(yǎng)NSCs,并加血清誘導(dǎo)其分化;利用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)分別檢測NSCs、神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白的表達(dá),加以證實;并應(yīng)用相差顯微鏡觀察NSCs的生長特點及分化后的細(xì)胞形態(tài)變化.②在培養(yǎng)基中加入不同濃度的GM

2、<,1>,應(yīng)用相差顯微鏡觀察GM<,1>對NSCs的增殖分化作用的影響.研究結(jié)果:①從大鼠大腦皮層及海馬能分離培養(yǎng)出具有連續(xù)克隆能力及很強(qiáng)增殖力的細(xì)胞,它們能穩(wěn)定表達(dá)巢蛋白,經(jīng)誘導(dǎo)分化后可表達(dá)神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性抗原.②與對照組相比,在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基中加入低濃度的GM<,1>,NSCs的生長無明顯改變,隨著GM<,1>濃度的增加,NSCs克隆球的體積逐漸減小,細(xì)胞逐漸死亡,形成大量的細(xì)胞碎片.③在DMEM/F12培養(yǎng)基中單獨加