凡納濱對蝦N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力調(diào)控的研究.pdf

1、凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)是全世界三大養(yǎng)殖對蝦中單位產(chǎn)量最高的蝦種。N—乙?！隆狣—氨基葡萄糖苷酶(N—Acetyl—β—D—glucosaminidase，簡稱NAGase，EC．3.2.1.52)在對蝦的蛻殼發(fā)育和營養(yǎng)代謝中發(fā)揮著重要作用。因此，研究凡納濱對蝦在患病過程的酶學(xué)變化，探討環(huán)境污染物、飼料添加劑、水產(chǎn)養(yǎng)殖常用藥物等對NAGase活力的影響與調(diào)控，以及對蝦活體急毒性試驗的開展，探究重金屬離子對

2、凡納濱對蝦NAGuse活力的影響，將有利于對蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展，為對蝦養(yǎng)殖水環(huán)境污染監(jiān)測提供更加充分、直觀的科學(xué)依據(jù)，并填補國內(nèi)外在這方面的研究空白。本文以凡納濱對蝦殼膜與內(nèi)臟所提NAGase為對象，展開以下幾方面的研究。 (1)跟蹤考察分析健康和患紅體病的凡納濱對蝦殼膜與內(nèi)臟NAGase的活力和性質(zhì)的差異。測得健康對蝦殼膜NAGase的活力為34.80 U/mg，內(nèi)臟NAGase的活力為35.34U/mg；而患紅體病對蝦殼膜NAGa

3、se的活力為38.32 U/mg，內(nèi)臟NAGase的活力為20.02 U/mg。結(jié)果表明：兩種來源對蝦的NAGase活力、基本酶學(xué)性質(zhì)等均存在差異。對蝦患紅體病后，殼膜與內(nèi)臟NAGase的催化反應(yīng)動力學(xué)常數(shù)Km和Vm值、活化能均較高，但其最適溫度較低，pH穩(wěn)定性及熱穩(wěn)定性較差。同時，對蝦患病前后，殼膜與內(nèi)臟來源的NAGase對外界各影響因子(Hg2+、Zn2+、Cu2+、Cd2+、Pb2+、Al3+等重金屬離子污染物；乙醇、甲醛、苯酚、

4、甲醇、二氧六環(huán)、DMF、DMSO等有機(jī)污染；脲、NBS、SDS等常用化學(xué)修飾劑及變性劑)的敏感性也發(fā)生了變化。 (2)養(yǎng)殖水體常用消毒藥物中，次氯酸鈉、三氯異氰尿酸、季氨鹽對凡納濱對蝦殼膜與內(nèi)臟來源的NAGase的活力有不同程度的影響。同時，次氯酸鈉、三氯異氰尿酸對兩種來源的酶的抑制為不可逆過程。青霉素鉀、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素等對殼膜與內(nèi)臟來源的NAGas活力基本上沒有影響；養(yǎng)殖常用的內(nèi)服、外用抗菌藥物中，鹽酸環(huán)丙沙星對兩

5、種來源的酶有激活作用，而諾氟沙星和磺胺甲噁唑?qū)γ富盍t有不同程度的抑制作用?；前芳讎f唑?qū)つAGase表現(xiàn)為混合型可逆抑制，對內(nèi)臟來源的NAGase表現(xiàn)為非競爭性抑制；諾氟沙星對內(nèi)臟來源的NAGase為混合型可逆抑制?？疾鞄追N養(yǎng)殖常用維生素對內(nèi)臟NAGase活力的影響，其中VB12、煙酸、核黃素等對酶活力基本上沒有影響；而VB1、VB6、抗壞血酸等對該酶活力均有不同程度的抑制作用，進(jìn)一步研究了VB6的抑制作用動力學(xué)，其對酶的抑制作用為