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文檔簡介
1、為探討CB1受體信號通路在應(yīng)激調(diào)控食欲過程中起到的作用,本課題進(jìn)行了以下研究。
本研究通過測定不同日齡家禽各組織中CB1受體的表達(dá)量,研究CB1受體的時空分布。選擇體重相近的7,21和35日齡的肉仔雞和7日齡蛋公雛各8只,采集下丘腦,肝臟,十二指腸,空腸,回腸。試驗結(jié)果顯示,在7,21和35日齡的肉仔雞和7日齡蛋公雛中,CB1受體在下丘腦中的表達(dá)量均遠(yuǎn)高于其他外周組織,且下丘腦中CB1受體的表達(dá)量隨日齡的增加而顯著增加,在7日
2、齡時,肉仔雞和蛋公雛各組織中CB1受體的表達(dá)量并不存在差異。
本研究通過熱應(yīng)激和糖皮質(zhì)激素DEX處理,研究應(yīng)激時CB1受體及相關(guān)基因表達(dá)的變化情況。熱應(yīng)激試驗:選擇體重相近的28日齡雄性AA肉仔雞144只,分為四組(10h熱應(yīng)激組,10h對照組,72h熱應(yīng)激組,72h對照組),每組6個重復(fù),每個重復(fù)6只雞。DEX試驗:選擇體重相近的28日齡雄性AA肉仔雞144只,分為四組(24hDEX組、24h對照組,72h DEX組,72h
3、對照組),每組6個重復(fù),每個重復(fù)6只雞。試驗結(jié)果顯示,應(yīng)激(熱應(yīng)激和DEX處理)可導(dǎo)致采食量和體增重的顯著降低,肛溫的顯著升高。熱應(yīng)激時,肉仔雞下丘腦中GR mRNA表達(dá)量顯著增加,AMPKα1mRNA表達(dá)量顯著降低,AMPK磷酸化水平降低。DEX處理時,肉仔雞下丘腦中GR、AMPKα2、LKB1、CB1受體mRNA的表達(dá)量顯著升高,AMPK磷酸化水平升高。說明,糖皮質(zhì)激素可以激活CB1受體和AMPK信號通路,從而調(diào)控了食欲,能量代謝和
4、平衡。
本研究通過腦室注射CB1受體激活劑ACEA和拮抗劑SR141716,研究CB1受體對AMPK信號通路的影響。兩個試驗均選擇體重165g左右的7日齡肉仔雞40只進(jìn)行腦室埋管,恢復(fù)至10日齡進(jìn)行腦室注射,腦室注射SR141716分為DMSO組,0.1,1,2ugSR141716組,腦室注射ACEA分為DMSO組,0.5,1,2ug ACEA組,每半小時統(tǒng)計采食量。根據(jù)結(jié)果分別選擇1ug SR141716和2ug ACEA為
5、最佳注射劑量,1h和3h為最佳采樣時間,進(jìn)行重復(fù)試驗。試驗結(jié)果顯示,腦室注射SR141716使肉仔雞采食量下降,下丘腦中CB1受體、AMPKα2、CART mRNA表達(dá)量顯著升高,AgRP、POMCmRNA表達(dá)量顯著降低。說明,抑制CB1受體可通過降低促食欲基因AgRP的表達(dá),升高抑食欲基因CART的表達(dá),抑制家禽食欲。腦室注射ACEA可增加肉仔雞的采食量,降低了其下丘腦中CB1受體、POMC mRNA的表達(dá)水平,升高了AgRP的mRN
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