MiR-145通過Nanog抑制胃癌干細(xì)胞形成的研究.pdf

1、目的：探討miR-145對不同生長方式胃癌干細(xì)胞形成的影響，為胃癌的早期診斷和判斷預(yù)后提供新方向。
　　方法：通過收集2012年3月至2013年9月廈門大學(xué)附屬中山醫(yī)院胃腸外科胃癌手術(shù)切除標(biāo)本共95例，每例均包括胃癌組織及相對應(yīng)的胃正常上皮組織。以miR-145作為研究對象，采用RT-PCR方法檢測胃癌組織及相對應(yīng)胃正常上皮組織中miR-145的表達(dá)情況。應(yīng)用生物信息學(xué)軟件預(yù)測miR-145的靶基因，選擇干細(xì)胞相關(guān)因子Nanog作

2、為研究對象。采用熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)檢測miR-145與Nanog靶向關(guān)系。RT-PCR方法檢測Nanog mRNA在不同生長方式胃癌中的表達(dá)水平，并通過慢病毒轉(zhuǎn)染在胃癌細(xì)胞MGC-803中過表達(dá)miR-145，采用無血清培養(yǎng)形成腫瘤球（sphero id）方法檢測其對胃癌干細(xì)胞形成的影響。
　　結(jié)果：（1）胃癌組織中miR-145的表達(dá)水平明顯低于相應(yīng)胃正常上皮組織，在浸潤型胃癌中的表達(dá)水平明顯低于膨脹型胃癌，miR-145在年

3、齡較大（≥60歲）、瘤體較大（≥7cm）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移較多（N2+N3）、臨床分期較晚（Ⅲ期+Ⅳ期）、Borrmann氏分型的Ⅰ型和Ⅱ型胃癌和M ing氏分型中的膨脹型胃癌中的表達(dá)水平分別顯著高于年齡較?。ǎ?0歲）、瘤體較?。ǎ?cm）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移較少（N0+N1）、臨床分期較早（Ⅰ期和Ⅱ期）、Borrmann氏分型的Ⅲ型+Ⅳ型胃癌和Ming氏分型中的浸潤型。（2）Nanog mRNA在浸潤型胃癌組織中的表達(dá)水平高于膨脹型胃癌組織。（3

4、）miR-145和Nanog在胃癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。（4）過表達(dá)miR-145能有效抑制胃癌細(xì)胞瘤球形成，而當(dāng)上調(diào)Nanog的表達(dá)時(shí)，腫瘤細(xì)胞的增殖能力可以部分被逆轉(zhuǎn)，胃癌細(xì)胞單克隆成瘤能力就隨之增加。
　　結(jié)論；兩型胃癌中miR-145表達(dá)均下調(diào)，在浸潤型胃癌下調(diào)更明顯。相反地，Nanog在兩型胃癌中表達(dá)均升高，在浸潤型胃癌中升高更明顯，兩者負(fù)相關(guān)。MiR-145通過Nanog抑制兩型胃癌干細(xì)胞的形成，兩者有望成為診斷和判斷