2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  胃癌的發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟、多基因作用的復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程,目前胃癌發(fā)病的分子機(jī)制尚不明確。胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGFs)家族是一種與胰島素高度同源的蛋白家族,細(xì)胞表面受體(IGF-1R和IGF-2R)與相應(yīng)的配體(IGF-1和IGF-2)結(jié)合形成IGF信號(hào)通路。IGF-1通過(guò)激活細(xì)胞膜外受體一胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-1R),啟動(dòng)MAPK通路和PI3k/Akt信號(hào)通路,參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展,如細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞分

2、化及血管生成等。FoxO1是叉頭轉(zhuǎn)錄因子家族成員,是PI3K/Akt通路下游的效應(yīng)分子,參與細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡的重要的轉(zhuǎn)錄因子。FoxO1活性受到磷酸化、乙?;?、泛素化等調(diào)節(jié)。IGF-1信號(hào)通路在胃癌中的作用及具體機(jī)制罕有報(bào)道。那么,IGF-1是否通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路對(duì)FoxO1的活性調(diào)節(jié),進(jìn)而影響胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)呢?因此,在研究中,探討IGF-1通路在胃癌事件中的調(diào)控機(jī)制及相關(guān)生物學(xué)功能,為今后胃癌的臨床診斷和治療新靶點(diǎn)提供理論依

3、據(jù)。
  方法:
  1.收集2008年至2013年在山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院胃腸外科住院治療的29例胃癌患者,以26例正常健康對(duì)象作為對(duì)照。放射免疫分析法檢測(cè)胃癌患者及正常健康對(duì)象中血清中IGF-1的水平。Western blot方法檢測(cè)29例患者及配對(duì)正常的癌旁組織中磷酸化IGF-1R的表達(dá)情況。
  2.選取胃癌細(xì)胞株AGS作為研究對(duì)象,分別用IGF-1(100ng/ml) Akt抑制劑LY294002(20μ m

4、ol/l)以及雷帕霉素(200nmol/l)三種藥物處理細(xì)胞株,采用westernblot方法檢測(cè)磷酸化IGF-1R、磷酸化Akt,磷酸化mTOR蛋白表達(dá)情況,應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測(cè)胃癌細(xì)胞增殖的變化情況。
  3.采用基因轉(zhuǎn)染的方法,將持續(xù)核表達(dá)的FoxO1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至AGS細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞標(biāo)記為AGS-nFoxO1細(xì)胞。免疫細(xì)胞熒光法檢測(cè)FoxO1的表達(dá)定位情況。經(jīng)IGF-1處理后,應(yīng)用Wester

5、n blot方法檢測(cè)IGF-1對(duì)空載體及FoxO1轉(zhuǎn)染AGS細(xì)胞后磷酸化IGF-1R、磷酸化Akt、磷酸化mTOR蛋白表達(dá)情況。MTT法檢測(cè)持續(xù)核表達(dá)FoxO1后胃癌細(xì)胞增殖的變化。
  結(jié)果:
  1.胃癌患者血清中IGF-1水平高于正常健康對(duì)照人群。與配對(duì)的正常組織相比,胃癌組織中磷酸化IGF-1R(pIGF-1R)的水平較高。
  2.經(jīng)濃度100ng/ml的IGF-1處理細(xì)胞系A(chǔ)GS和SNU-5后pIGF-1R

6、、p-Akt、p-mTOR均顯著增加;細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示均促進(jìn)了胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。經(jīng)特異性Akt抑制劑LY294002處理后,IGF-1對(duì)Akt磷酸化作用、mTOR磷酸化作用完全消失,且能促進(jìn)胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。而經(jīng)mTOR抑制劑雷帕霉素處理后,IGF-1對(duì)mTOR磷酸化作用完全消失,但不影響IGF-1R磷酸化作用及Akt磷酸化作用,同時(shí)對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響。
  3.將持續(xù)核表達(dá)的FoxO1的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至AGS細(xì)胞中,免疫熒光方法檢測(cè)

7、經(jīng)IGF-1處理后的AGS-nFoxO1中FoxO1高表達(dá),但不能被磷酸化,MTT顯示胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用受到抑制。
  結(jié)論:
  1.IGF-1R信號(hào)通路在胃癌發(fā)病機(jī)制中有一定作用。
  2.IGF-1R誘導(dǎo)Akt磷酸化促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng),但不改變mTOR磷酸化水平。Akt是IGF-1受體的激活的下游,是mTOR信號(hào)通路的上游。
  3.IGF-1促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)是非mTOR依賴(lài)性的。
  4.GF-1通過(guò)抑

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