Wdr5通過(guò)Wnt通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的研究.pdf

1、分類(lèi)號(hào)：分類(lèi)號(hào)：R575密級(jí)：密級(jí)：公開(kāi)公開(kāi)研究生學(xué)位論文論文題目（中文論文題目（中文）Wdr5通過(guò)通過(guò)Wnt通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的研通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的研究論文題目（外文論文題目（外文）Wdr5promotinghepatocellularcarcinomacellsproliferationviaWntsignalingpathway研究生姓名研究生姓名王曉鋒王曉鋒學(xué)科、專(zhuān)業(yè)學(xué)科、專(zhuān)業(yè)臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)內(nèi)科學(xué)內(nèi)科學(xué)研究方向研究方向消

2、化道腫瘤學(xué)位級(jí)別學(xué)位級(jí)別碩士導(dǎo)師姓名、職稱(chēng)導(dǎo)師姓名、職稱(chēng)周永寧周永寧教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月20152015年3月至月至20162016年3月論文提交日期論文提交日期20162016年3月論文答辯日期論文答辯日期20162016年5月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期20162016年6月校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市Wdr5通過(guò)通過(guò)Wnt通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的研究通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的研究中文摘要中文摘要目的目的：研究發(fā)現(xiàn)

3、Wdr5在干細(xì)胞的分化、全能性維持以及腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，下調(diào)Wdr5可以抑制成骨細(xì)胞的增殖，而上調(diào)Wdr5可以促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的增殖及自我更新能力。然而Wdr5對(duì)肝癌細(xì)胞增殖能力的影響未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬通過(guò)構(gòu)建Wdr5干擾模型，采用慢病毒轉(zhuǎn)染的方法感染肝癌細(xì)胞后觀察肝癌細(xì)胞增殖能力的變化來(lái)探討其對(duì)肝癌細(xì)胞增殖能力的影響及其可能的機(jī)制，為原發(fā)性肝癌的診斷及臨床治療提供新的的思路及理論依據(jù)。方法方法：通過(guò)構(gòu)建Wdr5的shRN

4、A模型shWdr5A和shWdr5B，并通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染方法感染靶細(xì)胞（人肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2），用qPCR和Westernblot方法檢測(cè)干擾后Wdr5的表達(dá)水平驗(yàn)證感染效果。進(jìn)而通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)和MTT法檢測(cè)下調(diào)或沉默Wdr5表達(dá)之后對(duì)肝細(xì)胞增殖的影響，并用qPCR和Westernblot檢測(cè)Wnt通路中關(guān)鍵基因βcatenin表達(dá)水平的變化來(lái)探索Wdr5是否通過(guò)經(jīng)典Wntβcatenin通路，并調(diào)節(jié)關(guān)鍵基因βcatenin

5、的表達(dá)而影響肝癌細(xì)胞的增殖。結(jié)果：結(jié)果：成功構(gòu)建Wdr5的干擾模型后，通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染方法感染肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2，qPCR和Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示干擾后Wdr5的表達(dá)水平較對(duì)照組明顯下降?？寺⌒纬蓪?shí)驗(yàn)和MTT法結(jié)果顯示，當(dāng)Wdr5表達(dá)被沉默或下調(diào)后，肝癌細(xì)胞株Huh7和HepG2的克隆形成和細(xì)胞增殖能力顯著降低。進(jìn)一步通過(guò)qPCR和Westernblot法檢測(cè)Wnt通路關(guān)鍵基因βcatenin表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)在Huh