煤工塵肺患者血清中顆粒酶B抗體的表達(dá)水平及其意義.pdf

1、背景和目的：
　　煤工塵肺是塵肺病的一種，是煤礦工人在職業(yè)活動(dòng)中因長期吸入生產(chǎn)性粉塵麗罹患的肺組織廣泛纖維化為主的全身性疾病。雖然國內(nèi)外對塵肺病的發(fā)生發(fā)展過程進(jìn)行了大量研究，但其具體機(jī)制還不十分明確。近年來的研究表明，機(jī)體免疫功能與塵肺病密切相關(guān)。本課題組前期采用噬菌體單鏈抗體庫技術(shù)成功篩選出與人源塵肺病相關(guān)的6種強(qiáng)陽性克隆抗體，其中包括顆粒酶B(Granzyme，GzmB)抗體。顆粒酶是一種來自于細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞(CTLs)和自然

2、殺傷細(xì)胞(NK)釋放的細(xì)胞漿顆粒的外源性絲氨酸蛋白酶，以往研究發(fā)現(xiàn)顆粒酶B在特發(fā)性纖維化患者肺組織中的表達(dá)增加，但顆粒酶B及其抗體在塵肺病中的表達(dá)變化及其意義尚未見報(bào)道。為此，采用人群流行病學(xué)調(diào)查研究，對煤工塵肺患者及接塵工人血清中GzmB抗體的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，初步探討其在煤工塵肺病發(fā)生發(fā)展過程中的作用及意義，為煤工塵肺病發(fā)病機(jī)制的研究提供相關(guān)依據(jù)。
　　方法：
　　1、調(diào)查對象:共選擇調(diào)查對象1260例，分為4組。其中:

3、健康對照組393例，為河南省某醫(yī)院的男性健康體檢者;病例組328例，為河南省兩市男性煤礦工人，根據(jù)現(xiàn)行塵肺病X線診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為煤工塵肺患者;觀察對象組230例，男性煤礦工人，為同地區(qū)診斷的X射線胸片已出現(xiàn)塵肺病變但尚未達(dá)到壹期塵肺;接塵組309例，為同地區(qū)相同工作環(huán)境中正在接塵但X射線胸片尚未出現(xiàn)塵肺病變表現(xiàn)的男性煤礦工人。所有研究對象均接受問卷調(diào)查，且均排除自身免疫病及其他肺部疾病。
　　2、對全部調(diào)查對象進(jìn)行問卷調(diào)查，內(nèi)容包括

4、:塵肺病診斷報(bào)告、接塵作業(yè)史、個(gè)人基本情況、是否有家族遺傳病史以及既往病史。
　　3、血清標(biāo)本的采集與檢測:對調(diào)查對象進(jìn)行空腹取外周靜脈血5ml，分離收集血清，放入-80℃冰箱保存，避免反復(fù)凍融。采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked-immunosorbent serologic assay，ELISA)法檢測所有調(diào)查對象血清中GzmB抗體的表達(dá)水平。
　　4、統(tǒng)計(jì)方法:采用Excel2007建立數(shù)據(jù)庫，應(yīng)用SPS

5、S21.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)庫進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定量資料統(tǒng)計(jì)描述以（(x)±s）表示;定性資料率的比較采用x2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果：
　　1、煤工塵肺患者血清中GzmB抗體的OD值為1.478±0.450，高于接塵組（1.325±0.463）和對照組（1.377±0.430），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2、不同年齡調(diào)查對象血清GzmB抗體的表達(dá):觀察對象組中20～歲組血清中GzmB抗體OD值（

6、1.215±0.424）低于40～歲組（1.469±0.453），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);煤工塵肺組中20～歲組GzmB抗體OD值（1.183±0.502）、40～歲組（1.359±0.430）低于60～歲組（1.539±0.442），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。接塵組中20～歲組GzmB抗體OD值（1.267±0.459）低于40～歲組（1.446±0.449），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3、對

7、觀察對象組和煤工塵肺組按分別按工齡、吸煙和飲酒分組，煤工塵肺組中，壹期塵肺中工齡＜25年組GzmB抗體表達(dá)量OD值為1.418±0.457，工齡＞25年組GzmB抗體表達(dá)量OD值為1.534±0.443，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。吸煙、飲酒狀況不同，血清中GzmB抗體的表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　煤工塵肺病人及接塵工人血清中GzmB抗體表達(dá)水平高非接塵人群，隨著接塵工齡的增加GzmB抗