人臍帶間充質干細胞抑制小鼠同種異基因骨髓移植中aGVHD的初步研究.pdf

1、目的：研究小鼠同種異基因骨髓移植中過繼性輸注人臍帶間充質干細胞（HUCMSCs）對急性移植物抗宿主?。╝GVHD）的抑制作用。
　　 方法：本研究采用了一種新的分離HHCMSCs的方法，經(jīng)膠原酶Ⅱ對人臍帶組織消化2h得到比較混雜的細胞，傳代至P3后細胞為較純的HUCMSCs。HHCMSCs與CFSE標記的CD4+CD25-T細胞共培養(yǎng)，流式測定CD4+CD25-T細胞的增殖情況。建立C57BL/6→DBA/2小鼠aGVHD模型，

2、即aGVHD組。在此模型基礎上，過繼性輸注HUCMSCs，即為HUCMSCs治療組。對兩組受鼠的體重、生存情況、相關病理學檢查、淋巴細胞亞群、血清中的細胞因子進行比較。
　　 結果：HUCMSCs在重組人IFN-γ的刺激下能夠顯著地抑制CD4+CD25-T細胞的增殖，且這一作用是通過IDO介導的。體內實驗發(fā)現(xiàn)，過繼性輸注HUCMSCs后受鼠aGVHD各項病癥明顯減輕，生存期顯著延長。另外，通過對血清中細胞因子的測定發(fā)現(xiàn)，在移植后

3、第7d，實驗組IFN-γ、IL-12分泌量顯著高于aGVHD組；而IL-4水平無顯著性差異。而且發(fā)現(xiàn)過繼性輸注HUCMSCs后第21dCD3+NK1.1+NKT細胞較第7d升高。
　　 結論：IFN-γ能夠通過IDO的表達增強小HUCMSCs在體外的免疫抑制功能，過繼性輸注HUCMSCs能夠抑制小鼠同種異基因骨髓移植后出現(xiàn)的aGVHD。這些為體外擴增的HUCMSCs抑制aGVHD作用機理的研究及HUCMSCs細胞療法的臨床運用提