截癱三聯(lián)針對SD大鼠脊髓損傷神經(jīng)功能保護及行為學的影響.pdf

1、目的：觀察截癱三聯(lián)針治療SD大鼠脊髓損傷的有效性，探討其可能的作用機制，為臨床脊髓損傷的治療提供實驗依據(jù)。
　　方法：采用改良鉗夾法建立大鼠急性脊髓損傷模型，將75只脊髓損傷大鼠隨機分為5組，每組15只。A組：治療組（截癱三聯(lián)針+甲基強的松龍），B組：對照組（常規(guī)針刺+甲基強的松龍），C組：基礎(chǔ)治療組（甲基強的松龍）， D組：模型組，E組：假手術(shù)組。甲基強的松龍治療，于脊髓損傷術(shù)后即刻行甲基強的松龍腹腔注射；電針治療，A、B兩組分

2、別于脊髓損傷術(shù)后4h行相應(yīng)腧穴電針治療，模型組與假手術(shù)組不做任何治療。各組大鼠分別于1、3、7天行行為學運動功能BBB評分觀察大鼠神經(jīng)功能變化后，取損傷段脊髓組織行伊紅-蘇木素（HE）染色觀察脊髓組織結(jié)構(gòu)變化，并通過免疫組織化學方法（IHC）觀察各組大鼠急性脊髓損傷后降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）、半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）陽性細胞的表達情況。
　　結(jié)果:1.行為學結(jié)果顯示：①與E組比較，A、B、C、D組大鼠1、3、7天

3、BBB評分均明顯降低（P＜0.05）；②治療1d后，A、B、C、D各組大鼠后肢 BBB評分未見明顯差異（P＞0.05）；③治療3d后，A、B、C各組評分均高于D組（P＜0.05），A、B、C各組比較未見明顯差異（P＞0.05）；④治療7 d后， A、B組評分均高于C、D組（P＜0.05），A、B兩組比較未見明顯差異（P＞0.05），C組評分高于D組（P＜0.05）；⑤A、B、C、D各組1 d、3d、7d組內(nèi)比較， BBB評分均有不同程度

4、的恢復(fù)，差異均具有統(tǒng)計學意義（P﹤0.05）；⑥E組各個時間點比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　2. HE染色結(jié)果顯示：各治療組及模型組脊髓內(nèi)均可見不同程度的出血灶、炎性細胞浸潤，壞死、空洞形成，亦可見殘存神經(jīng)元胞體變圓、胞核固縮、邊置、消失，且白質(zhì)與灰質(zhì)界限不清；與模型組相比，A、B、C各組脊髓組織病理學改變明顯減輕；假手術(shù)組各個時間點神經(jīng)元結(jié)構(gòu)形態(tài)規(guī)則，白質(zhì)致密，無明顯出血、水腫、壞死、炎細胞浸潤等變化。
　　

5、3.免疫組化結(jié)果顯示：①CGRP：A、B、C、D、E各組均可見陽性細胞表達，1 d、3 d與 E組比較，脊髓損傷各組陽性細胞表達量明顯低于 E組（P＜0.05）；治療7d后， A、B兩組陽性細胞表達與 E組比較未見明顯差異（P＞0.05），C、D兩組陽性細胞表達明顯低于 E組（P＜0.05）；A、B兩組各個時間點陽性細胞表達量明顯高于 C、D兩組（P＜0.05）；A組與B組比較和C組與D組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；A組1d與

6、3d、1d與7d、3d與7d組內(nèi)比較，B、C、D三組1d與7d、3d與7d比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　②Caspase-3：假手術(shù)組僅見少量的陽性細胞，脊髓損傷后各組均可見陽性細胞表達，1d、3d、7d，A、B、C、D各組陽性細胞表達明顯高于E組（P＜0.05），A、B、C各組陽性細胞表達明顯低于D組（P＜0.05）；治療1d后，A、B、C組陽性細胞表達未見明顯差別（P＞0.05）；治療3d、7d后，A、B兩組

7、陽性細胞表達低于C組（P＜0.05），但A、B兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；A、B兩組1d與3d、3d與7d組內(nèi)比較，C、D兩組1d與3d、1d與7d、3d與7 d組內(nèi)比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1．截癱三聯(lián)針在改善脊髓損傷大鼠后肢運動功能方面有效；
　　2．截癱三聯(lián)針的作用機制可能與促進神經(jīng)保護因子CGRP的表達，抑制細胞凋亡因子Caspase-3的表達，從而抑制細胞凋亡，